中国农业科学 ›› 1998, Vol. 31 ›› Issue (02): 14-19 .

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水稻第12染色体微分离及LA-PCR扩增

魏建华,周奕华,孙传清,党本元,胡赞民,王象坤,陈正华   

  1. 中国科学院遗传研究所,北京 100101 中国农业大学
  • 出版日期:1998-03-20 发布日期:1998-03-20

  1. 中国科学院遗传研究所,北京 100101 中国农业大学
  • Online:1998-03-20 Published:1998-03-20

摘要: 首次以粳稻第12号三体为材料,采用玻璃针染色体微分离法,成功地分离到了水稻第12号染色体。将分离到的染色体转入0.5ml装有蛋白酶K的Eppendorf管中,经酶解及Sau3A酶切后在染色体DNA片段两端加上Sau3A人工接头,经两次PCR扩增,得到300~1000bp的染色体DNA片段。Southern杂交表明,这些染色体扩增片段与水稻基因组DNA之间有同源性,从而证明成功地扩增了分离的特定目标染色体。本文结果为分离及体外扩增水稻特定目标染色体找到一条有效的途径。

关键词: 水稻, 三体, 染色体微切割, LA-PCR