中国农业科学 ›› 2010, Vol. 43 ›› Issue (16): 3323-3330 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.16.007
周佳,李凤霞,陈帅,罗成刚,刘贯山,蒋彩虹,杨爱国,苏振刚,王元英
ZHOU Jia, LI Feng-xia, CHEN Shuai, LUO Cheng-gang, LIU Guan-shan, JIANG Cai-hong, YANG Ai-guo, SU Zhen-gang, WANG Yuan-ying
摘要:
【目的】从高抗PVY烟草品种VAM中克隆抗病相关基因,分析该基因的序列特征、进化关系和表达特性,研究其在烟草抗PVY防御反应中的作用,为培育抗PVY烟草新品种奠定基础。【方法】利用SSH结合cDNA芯片筛选出来的病害诱导特异表达基因片段,通过RACE技术克隆烟草抗病相关基因;生物信息学分析该基因保守结构域以及序列特征;采用MEGA4.0软件构建系统进化树;利用实时荧光定量RT-PCR技术研究该基因的表达特性。【结果】克隆了1个烟草抗病相关基因,命名为NtPsaN,该基因具有PsaN基因家族保守结构域,OFR长度507 bp,编码168个氨基酸;构建了PsaN亚基系统进化树;实时荧光定量RT-PCR结果显示接毒之后该基因表达与不接毒对照相比有明显上调趋势。【结论】克隆得到一个烟草PVY抗病相关基因NtPsaN,其表达受PVY侵染诱导,该基因可能在烟草抵御PVY病害侵染过程中起重要作用。