【背景】口蹄疫（foot and mouth disease, FMD）是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、烈性传染病，疫苗接种是预防临床口蹄疫的有效措施。免疫抗体水平监测则是评估疫苗免疫效果、制定免疫程序的重要依据，是免疫工作和疫情防控必不可少的关键环节，因此建立高效、快速、全自动的抗体检测方法具有重要意义。【目的】基于磁微粒（micromagnetic particles，MPs）化学发光免疫分析技术（CLIA），建立一种新型 、全自动、可定量的口蹄疫病毒O型抗体检测方法，为口蹄疫免疫监测和疫情防控提供技术支撑。【方法】使用纳米材料磁微粒为固相载体和分离载体包被捕获抗体，用碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）标记检测抗体，经过条件优化建立了一种新型磁微粒CLIA检测方法(magnetic particle chemiluminescence immunoassay, MP-CLIA)。本方法首先加入磁微粒-兔抗偶联物 (magnetic particle-polyclonal antibodies, MPs-pAbs)、待测样本、口蹄疫病毒O型抗原，37 ℃孵育;再加入适量酶标抗体（ALP-pAbs），37 ℃孵育;最后加入化学发光底物AMPPD，检测相对发光强度（relative light unit,RLU）。研究通过检测标准品拟合标准曲线，并应用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic，ROC）确定检测方法的判定标准;利用质控样本进行方法学评价，同时检测田间样本，并和液相阻断ELISA（LPB-ELISA）比对，验证临床检测效果。【结果】优化后最佳反应条件为磁微粒浓度0.25 mg·mL-1、口蹄疫病毒O型抗原1﹕1 000稀释、酶标抗体1﹕2 000稀释、加样量20 µL。整个检测过程均在全自动化学发光免疫分析仪中完成，反应时间20 min，在抗体含量0-1 280 U(效价0-1﹕2 048)范围内标准曲线R 2>0.99，可进行定量检测。该方法敏感性为94.66%;特异性为97.10%，检测口蹄疫A型、Asia I型血清型特异性为97.14%，与塞内卡病毒（SVV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、牛流行热病毒（BEFV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、羊痘病毒（QRFV）、小反刍兽疫病毒（PPRV）抗体阳性血清无交叉反应;重复检测变异系数 CV值<10%;田间样本检测结果与LPB-ELISA符合率为94.69%，定量结果相关系数R 2为0.8473, P<0.0001，相关性显著。【结论】建立的MP-CLIA方法耗时短、操作简便，配套国产全自动化学发光仪，可进行全自动化检测，是一种新型、高效的口蹄疫病毒O型抗体定量检测方法，本方法对应的试剂盒已经完成中试生产和临床检测试验，在全国不同区域试用效果较好，具有较高的临床应用价值。
