【目的】挖掘保存茶树种质利用潜力,选育优良茶树新品种,为贵州茶树新品种选育和茶树种质资源高效鉴定利用提供参考依据。【方法】以资源圃内保存的128份茶树种质为材料,系统测定其6个农艺性状(耐寒性、物候期、芽叶形态等)与14个生化成分(儿茶素类、生物碱类、茶氨酸等),结合遗传多样性分析、相关性分析、聚类分析、主成分分析和灰色关联分析开展综合评价。【结果】128份茶树种质的20个性状指标变异系数为13.33%—114.10%,遗传多样性指数为0.92—2.08,农艺性状平均变异系数(31.66%)与遗传多样性指数(1.63)均低于生化性状(49.80%、1.86)。一芽三叶长、3-没食子酰基奎宁酸、咖啡碱、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)和茶氨酸含量呈正态分布,而没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)和1,2,6-三没食子酰葡萄糖(1,2,6-TGGP)分布高度集中。相关性分析显示,冻害指数与芽叶茸毛呈显著正相关(P<0.05),与芽叶颜色、可可碱、咖啡碱和表儿茶素(EC)呈显著或极显著负相关(P<0.05;P<0.01);一芽一叶期与一芽三叶长、芽叶茸毛、咖啡碱和EGCG呈显著或极显著正相关(P<0.05;P<0.01),与3-没食子酰基奎宁酸、没食子酸、EC、ECG、茶氨酸呈极显著负相关(P<0.01)。不同物候期种质差异较大,在芽叶茸毛、咖啡碱、EGCG等8个性状上存在显著差异(P<0.05)。聚类分析将128份种质划分为7个类群,物候期、产量指标等农艺性状和咖啡碱、EGCG、茶氨酸等主要生化成分是区分不同类群种质的关键性状。主成分分析提取7个主成分,累计贡献率为69.35%,EGCG、咖啡碱、表没食子儿茶素(EGC)、EC等生化性状是影响种质综合得分F值的核心指标。以特早生、强耐寒性和高含量茶氨酸为基准构造理想品种开展灰色关联度分析,128份种质与理想品种间的加权关联度为0.51—0.73,GT-GY-05、HJY-F1-55、GT-AS-41、GT-LP-01和JAL1的加权关联度超过0.7。【结论】128份茶树种质表现出丰富的遗传多样性,生化性状的变异水平与多样性指数整体高于农艺性状。咖啡碱、EGCG、ECG等核心组分遗传稳定性较高,甲基化儿茶素、3-没食子酰葡萄糖等稀有次生代谢成分变异丰富,具备较高的特异性选育潜力。高加权关联度种质GT-AS-41(0.71)兼具特早生、强耐寒性和较高茶氨酸含量,有望育成特早生优质茶树品种。