中国农业科学 ›› 2025, Vol. 58 ›› Issue (1): 10-29.doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2025.01.002
王伟(), 吴传磊, 胡晓渝, 李佳佳, 白鹏宇, 王郭伋, 苗龙, 王晓波*(
)
收稿日期:
2024-05-23
接受日期:
2024-06-11
出版日期:
2025-01-01
发布日期:
2025-01-07
通信作者:
联系方式:
王伟,E-mail:1275621348@qq.com。
基金资助:
WANG Wei(), WU ChuanLei, HU XiaoYu, LI JiaJia, BAI PengYu, WANG GuoJi, MIAO Long, WANG XiaoBo*(
)
Received:
2024-05-23
Accepted:
2024-06-11
Published:
2025-01-01
Online:
2025-01-07
摘要:
【目的】基于全基因组鉴定分析大豆LOX基因家族成员,了解各成员的分类进化关系,研究各基因成员在不同组织中的表达特异性以及对非生物胁迫的响应,为进一步研究LOX基因家族的分子特征、进化历程以及功能研究提供理论基础。【方法】基于Ensembl数据库中水稻和拟南芥物种LOX蛋白序列,在大豆全基因组数据库中BLASTP比对同源LOX蛋白序列,使用MEGA X软件构建系统进化树;采用网站MEME进行蛋白保守基序分析;运用在线软件GSDS 2.0分析基因结构;运用TBtools进行染色体定位绘制;用McscanX分析大豆LOX家族复制基因;利用PlantCARE网站预测大豆LOX基因家族启动子元件;通过TBtools绘制不同组织及非生物胁迫下大豆基因表达热图,并对与百粒重显著相关的优异等位变异位点GmLOX15A1-G/A进行分子标记开发。【结果】大豆中共鉴定到43个LOX基因,不均匀地分布在13条染色体上。共线性分析表明,GmLOX基因在进化过程中经历了广泛的复制。同时,在LOX基因启动子中检测到39种不同类型的顺式调控元件,表明它们可能参与了不同的生长发育、光反应、应激反应与激素诱导等途径。表达模式分析发现LOX基因在大豆不同组织中具有不同的表达程度,表明该家族成员具有组织和时空表达特异性。干旱胁迫条件下,GmLOX基因在大豆根系和叶片中表达差异显著(P<0.05),其中,GmLOX3A3、GmLOX7A1、GmLOX20B1、GmLOX13A1和GmLOX20A2在根系和叶片中均显著上调或下调表达,推测GmLOX基因可能在逆境胁迫响应中发挥重要作用。同时,发现GmLOX15A1在籽粒组织中高表达且在该基因编码区第七外显子存在一处G/A优异等位变异,对该变异位点开发分子标记,并利用来自不同生态区1 200份大豆种质资源2年的百粒重数据,分析GmLOX15A1不同单倍型与百粒重的相关性,结果表明,相较于GmLOX15A1-A基因型,携带GmLOX15A1-G等位基因大豆种质的平均百粒重提高2.33 g(P<0.001)。【结论】在大豆中共鉴定到43个LOX家族成员,可分为3个亚家族。GmLOX基因启动子区存在大量激素和胁迫响应的顺式作用元件,在干旱胁迫响应中发挥不同的作用。其中,GmLOX15A1在籽粒组织中高表达且该基因编码区第七外显子存在一处G/A优异等位变异,相较于GmLOX15A1-A基因型,携带GmLOX15A1-G等位基因大豆种质的平均百粒重显著提高2.33 g,该位点可作为大豆籽粒大小遗传改良的优异单倍型。
王伟, 吴传磊, 胡晓渝, 李佳佳, 白鹏宇, 王郭伋, 苗龙, 王晓波. 大豆LOX基因家族的全基因组鉴定及GmLOX15A1基因等位变异对百粒重的影响[J]. 中国农业科学, 2025, 58(1): 10-29.
WANG Wei, WU ChuanLei, HU XiaoYu, LI JiaJia, BAI PengYu, WANG GuoJi, MIAO Long, WANG XiaoBo. Genome-Wide Identification of Soybean LOX Gene Family and the Effect of GmLOX15A1 Gene Allele on 100-Seed Weight[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2025, 58(1): 10-29.
表2
大豆GmLOX蛋白理化特性分析"
编号 No. | 基因ID Gene ID | 基因 Gene | 染色体 Chr. | 基因位置 Gene location (bp) | 氨基酸 <BOLD>A</BOLD>mino acid (aa) | 分子量 MW (kDa) | 等电点 pI |
---|---|---|---|---|---|---|---|
1 | Glyma.03G091000 | GmLOX3A1 | 03 | 27013300-27020898 | 866 | 99.48 | 9.04 |
2 | Glyma.03G237300 | GmLOX3A2 | 03 | 43723483-43730370 | 818 | 93.14 | 6.13 |
3 | Glyma.03G264300 | GmLOX3A3 | 03 | 45704553-45709164 | 901 | 102.13 | 7.96 |
4 | Glyma.04G105500 | GmLOX4A1 | 04 | 10440510-10445278 | 236 | 27.25 | 6.64 |
5 | Glyma.04G105900 | GmLOX4A2 | 04 | 10789400-10791837 | 227 | 26.20 | 5.22 |
6 | Glyma.07G006900 | GmLOX7A1 | 07 | 503752-509348 | 859 | 96.33 | 6.67 |
7 | Glyma.07G007000 | GmLOX7A2 | 07 | 509819-514700 | 864 | 96.82 | 6.05 |
8 | Glyma.07G034800 | GmLOX7A3 | 07 | 2763836-2770113 | 865 | 96.34 | 7.01 |
9 | Glyma.07G034900 | GmLOX7B1 | 07 | 2782231-2787974 | 868 | 97.87 | 6.49 |
10 | Glyma.07G039900 | GmLOX7B2 | 07 | 3288274-3294751 | 927 | 104.34 | 7.54 |
11 | Glyma.07G196800 | GmLOX7B3 | 07 | 36509005-36518982 | 910 | 103.04 | 7.33 |
12 | Glyma.08G102900 | GmLOX8A1 | 08 | 7886865-7892029 | 921 | 103.67 | 8.10 |
13 | Glyma.08G189200 | GmLOX8A2 | 08 | 15172904-15178499 | 860 | 96.74 | 7.17 |
14 | Glyma.08G189300 | GmLOX8A3 | 08 | 15186020-15191205 | 857 | 98.68 | 6.55 |
15 | Glyma.08G189400 | GmLOX8A4 | 08 | 15193038-15201472 | 846 | 94.99 | 7.17 |
16 | Glyma.08G189500 | GmLOX8A5 | 08 | 15206364-15212242 | 867 | 97.76 | 5.85 |
17 | Glyma.08G189600 | GmLOX8B1 | 08 | 15235197-15239971 | 866 | 97.17 | 6.41 |
18 | Glyma.08G189700 | GmLOX8B2 | 08 | 15242887-15243655 | 130 | 15.23 | 5.00 |
19 | Glyma.08G189800 | GmLOX8B3 | 08 | 15249052-15254212 | 868 | 97.14 | 7.44 |
20 | Glyma.10G153900 | GmLOX10A1 | 10 | 38898571-38904504 | 865 | 98.16 | 5.75 |
21 | Glyma.11G130200 | GmLOX11A1 | 11 | 9903923-9913136 | 906 | 103.80 | 7.38 |
22 | Glyma.11G130300 | GmLOX11B1 | 11 | 9925260-9936297 | 901 | 102.63 | 6.02 |
23 | Glyma.12G054700 | GmLOX12A1 | 12 | 3949453-3957386 | 914 | 104.41 | 7.64 |
24 | Glyma.13G030300 | GmLOX13A1 | 13 | 9773782-9780355 | 918 | 104.30 | 6.80 |
25 | Glyma.13G075900 | GmLOX13A2 | 13 | 17965521-17975820 | 803 | 92.46 | 7.52 |
26 | Glyma.13G239000 | GmLOX13A3 | 13 | 34926963-34931964 | 910 | 103.77 | 7.02 |
27 | Glyma.13G347500 | GmLOX13A4 | 13 | 43761727-43766023 | 866 | 97.27 | 6.66 |
28 | Glyma.13G347600 | GmLOX13B1 | 13 | 43769021-43773290 | 826 | 92.81 | 6.45 |
29 | Glyma.13G347700 | GmLOX13B2 | 13 | 43773475-43780320 | 853 | 96.46 | 5.98 |
30 | Glyma.13G347800 | GmLOX13B3 | 13 | 43797692-43803266 | 822 | 92.79 | 7.00 |
31 | Glyma.14G173500 | GmLOX14A1 | 14 | 42911150-42913226 | 231 | 26.75 | 5.09 |
32 | Glyma.15G026300 | GmLOX15A1 | 15 | 2123754-2128104 | 857 | 96.77 | 6.55 |
33 | Glyma.15G026400 | GmLOX15A2 | 15 | 2130531-2134563 | 856 | 96.38 | 6.81 |
34 | Glyma.15G026500 | GmLOX15B1 | 15 | 2142191-2147489 | 853 | 96.64 | 5.94 |
35 | Glyma.16G008700 | GmLOX16A1 | 16 | 735622-742337 | 922 | 104.01 | 7.38 |
36 | Glyma.16G082600 | GmLOX16A2 | 16 | 9227831-9237983 | 861 | 99.16 | 8.81 |
37 | Glyma.16G096200 | GmLOX16B1 | 16 | 18245957-18246472 | 160 | 18.31 | 7.66 |
38 | Glyma.19G263300 | GmLOX19A1 | 19 | 50591809-50596423 | 899 | 101.46 | 7.78 |
39 | Glyma.20G053700 | GmLOX20A1 | 20 | 12341598-12348808 | 859 | 97.25 | 5.88 |
40 | Glyma.20G054000 | GmLOX20A2 | 20 | 12411805-12423973 | 895 | 101.70 | 6.31 |
41 | Glyma.20G054100 | GmLOX20A3 | 20 | 12486755-12493110 | 860 | 97.88 | 5.99 |
42 | Glyma.20G144600 | GmLOX20B1 | 20 | 38316738-38324822 | 858 | 97.94 | 6.68 |
43 | Glyma.20G234400 | GmLOX20B2 | 20 | 46695256-46696124 | 153 | 17.26 | 5.94 |
表3
GmLOX蛋白保守基序的序列"
基序 Motif | 宽度 Width | 最佳匹配 Best possible match |
---|---|---|
1 | 95 | WLLAKAYVVVNDSCYHQLVSHWLNTHAVVEPFVIATNRHLSVVHPIYKLLFPHYRDTMNINSLARKSLVNADGIIEKTFLWGRYALEMSAVVYKD |
2 | 50 | APHGLRLVIEDYPYAVDGLEIWDAIKTWVHEYVSLYYPTDAAVQQDTELQ |
3 | 53 | AWWKEVVEKGHGDLKDKPWWPKMQTRQELIQSCSTIIWIASALHAAVNFGQYP |
4 | 48 | SETPAPLVKYREEELKNVRGDGTGERKEWDRIYDYDVYNDLGDPDKGE |
5 | 36 | SKSAWMTDEEFAREMIAGVNPCVIRRLQEFPPQSKL |
6 | 43 | YDEMTKNPQKAYLRTITPKFQALVDLSVIEILSRHASDEVYLG |
7 | 26 | YATRTILFLQDDGTLKPLAIELSLPH |
8 | 36 | GWTSDAQIIQAFKRFGNKLAEIEQKLIQRNNDETLR |
9 | 36 | EPNLGGLTVEQAIQNKKLFILDHHDYLIPYLRKINA |
10 | 19 | WVFTDQALPADLIKRGMAV |
表4
大豆籽粒高表达LOX同源基因SNP位点与百粒重差异分析"
序号 No. | 染色体 Chr. | 参考位点 Reference allele | 突变位点 Alternative allele | 物理位置 Position (bp) | 最大值 Max (g) | 最小值 Min (g) | 平均差 Ad (g) | T | P |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
1 | 10 | A | G | 38899630 | 15.69 | 15.14 | 0.55 | 0.91 | >0.05 |
2 | 13 | G | C | 43764053 | 15.89 | 14.38 | 1.51 | 2.02 | <0.05 |
3 | 13 | G | C | 43772226 | 16.39 | 14.79 | 1.60 | 2.16 | <0.05 |
4 | 15 | G | A | 2126515 | 15.76 | 13.79 | 1.97 | 3.21 | <0.01 |
5 | 20 | A | C | 46695808 | 15.73 | 15.40 | 0.33 | 0.46 | >0.05 |
表5
极端材料品种信息表"
编号 No. | 极端材料名称 Extreme material name | 来源 Source | 百粒重均值 Average 100-seed weight (g) |
---|---|---|---|
1 | ZDD05182 | 中国黄淮Huang-Huai, China | 27.45 |
2 | 早生75 Zaosheng75 | 中国黄淮Huang-Huai, China | 26.97 |
3 | 石庄大粒黄 Shizhuangdalihuang | 中国黄淮Huang-Huai, China | 26.71 |
4 | 早红豆 Zaohongdou | 中国南方Southern China | 25.93 |
5 | 潢川茶色豆 Huangchuanchasedou | 中国黄淮Huang-Huai, China | 25.80 |
6 | 系19 Xi19 | 中国黄淮Huang-Huai, China | 25.51 |
7 | Kirsches Stamm 2008 | 国外Abroad | 9.96 |
8 | 崇庆九月黄 Chongqingjiuyuehuang | 中国南方Southern China | 11.98 |
9 | 猴子毛 Houzimao | 中国南方Southern China | 13.91 |
10 | M044 | 未知Not available | 10.63 |
11 | 灰老鼠皮 Huilaoshupi | 中国黄淮Huang-Huai, China | 11.64 |
12 | 麻黄豆 Mahuangdou | 中国黄淮Huang-Huai, China | 10.38 |
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doi: 10.3389/fpls.2015.01021 pmid: 26635846 |
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