人工雄性不育基因和恢复基因的克隆及构建研究

中国农业科学 ›› 1996, Vol. 29 ›› Issue (03): 20-26 .

人工雄性不育基因和恢复基因的克隆及构建研究

曹光诚,孙勇如,陈占宽,赵世民,舒群芳,马江生,张利明,李文彬

中国科学院遗传研究所，北京 100101 河南省农业科学院实验中心

出版日期:1996-05-20 发布日期:1996-05-20

中国科学院遗传研究所，北京 100101 河南省农业科学院实验中心

Online:1996-05-20 Published:1996-05-20

摘要/Abstract

摘要： 本文报道了用于获得人工雄性不育系的质粒pTABNBAR55和用于获得人工恢复系的质粒pTABSBAR23的构建。用PCR的方法从烟草（Nicotiana tabacum cv.Samsun）中扩增了花药绒毡层特异表达TA29基因上游-291～+12共303bp的片段，称作TA29启动子（简写作pTA29）；从解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）中扩增了一种RNA酶及其特异抑制剂基因barnase和barstar。DNA序列分析表明，pTA29和barstar片段均与已发表的序列完全一致，barnase片段在3′端和已见报道的两种序列都有一个碱基的差异，但由此推断的氨基酸序列是一致的，不影响其在植物中的表达。把TA29启动子分别与barnase和barstar基因连接起来构成两个嵌合基因pTA29-barnase和pTA29-barstar，在这两个嵌合基因的3′端加上了260bp的Nos终止子（Nos.ter）以增强其在植物中的表达。然后将一个2.0kb的完整除草剂抗性标记“bar cassettee”插在含有这两个基因的质粒上，作为转化和制种过程的筛选标记。若将前者导入欲作杂交制种母本的植物中，可以获得雄性不育系；后者导入欲作父本的植物中，可获得恢复系。

关键词: 人工雄性不育, 育性恢复, 烟草, TA29启动子, Barnase基因, Barstar基因, 多聚酶链式反应（PCR）

Key words: NULL

曹光诚,孙勇如,陈占宽,赵世民,舒群芳,马江生,张利明,李文彬. 人工雄性不育基因和恢复基因的克隆及构建研究[J]. 中国农业科学, 1996, 29(03): 20-26 .

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