中国农业科学 ›› 2008, Vol. 41 ›› Issue (6): 1583-1590 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.06.003
王晓波,马传喜,何克勤,司红起,张业伦
摘要： 【目的】开发出小麦籽粒PPO活性的分子标记，并对新标记的应用进行研究，为面制食品外观品质的改良提供参考。【方法】根据一条由小麦2D染色体上PPO基因编码的mRNA序列（GenBank：AY515506）设计引物，对7个高PPO活性和7个低PPO活性小麦品种进行PCR扩增，筛选出有差异的引物，对130份小麦品种资源进行检测，验证不同带型与PPO活性的相关性，并利用一套中国春缺体、四体及双端体对STS标记进行染色体定位。在此基础上，结合一个位于小麦2A染色体上的PPO基因分子标记（PPO18），对新开发的标记在小麦低PPO活性分子标记辅助选择中的作用进行评价。【结果】在AY515506的不同位置共设计了8对引物，其中一对引物（STS01）在高、低PPO活性材料中表现出多态性。该引物在7个低PPO活性的材料中能扩增出560 bp的目标片段，在7个高PPO活性的材料中没有扩增出目标片段，利用中国春缺体、四体及双端体最终将该标记定位在2D染色体长臂上。利用该标记检测130份小麦品种，结果表明有75个品种可以扩增出560 bp的目标片段，其PPO活性均值为221.08 A475/（min•g•103）；55个品种没有扩增出目标片段，PPO活性均值为309.98 A475/（min•g•103），方差分析表明两者的差异达极显著水平（P＜0.01）。利用STS01和PPO18共同检测后发现，130份品种中，有37个品种的双标记扩增均表现出高活性带型（H1H2），这些品种PPO活性的均值为337.82 A475/（min•g•103），显著高于其它几种扩增带型品种的PPO活性均值（P＜0.01）。32个双标记扩增均表现为低活性带型（L1L2）的小麦品种PPO活性值普遍较低，可作为改良面制食品外观品质的候选亲本。【结论】STS01是一个位于小麦2D染色体长臂上PPO基因分子标记，可以在小麦PPO活性分子标记辅助选择中加以应用。
