适用于小麦叶片蛋白质组分析的样品制备方法

doi:10.3864/j.issn.0578-1752.at-2006-8153

中国农业科学 ›› 2007, Vol. 40 ›› Issue (10): 2169-2176 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.at-2006-8153

适用于小麦叶片蛋白质组分析的样品制备方法

刘伟霞,潘映红

中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程

收稿日期:2006-09-28 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-10-10 发布日期:2007-10-10

Development of 2-DE protocol for wheat leaf proteomics

中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程

Received:2006-09-28 Revised:1900-01-01 Published:2007-10-10 Online:2007-10-10

摘要/Abstract

摘要： 【目的】建立适用于小麦叶片蛋白质组分析的样品制备方法。【方法】以Taichung 29小麦苗期叶片为材料，分别采用改进的酚提取-甲醇/醋酸铵沉淀法及尿素/硫脲提取法提取总蛋白，进行双向电泳分离和胶体考染，并选取代表性的蛋白点进行MALDI-TOF质谱分析及数据库搜索。【结果】上述的两种方法可检测到较多的蛋白点数，分别为1 016±203和1 014±281，并能成功地完成代表性蛋白点的鉴定。【结论】作者建议，进行小麦叶片蛋白质组分析时，可采用本实验提供的两种样品制备方法。

关键词: 小麦叶片, 样品制备, 双向电泳, 质谱分析, 蛋白质组

Abstract: 【Objective】To develope an efficient and higher resolution 2-DE procedure for future wheat leaf proteome research.【Method】Sample preparation is carried out according to two protocols modified from former researchers,following 2-DE and MS analysis. 【Result】These two protocols presented here are efficient protein extraction methods,and both are compatible with MS analysis.【Conclusion】The results indicate that both protein extraction protocols utilized are useful in wheat leaf proteome research.

Key words: wheat leaf, 2-DE, peptide mass fingerprinting, sample preparation, proteome

刘伟霞,潘映红. 适用于小麦叶片蛋白质组分析的样品制备方法[J]. 中国农业科学, 2007, 40(10): 2169-2176 .

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