重组鸡白细胞介素2的诱导表达与生物学活性测定

中国农业科学 ›› 2005, Vol. 38 ›› Issue (05): 1034-1039 .

• 畜牧·兽医·资源昆虫 • 上一篇下一篇

重组鸡白细胞介素2的诱导表达与生物学活性测定

陈吉刚,陈维虎,周继勇,王金勇,齐静,郑肖娟,俞照正,孙红霞

浙江大学动物预防医学研究所病毒与免疫研究室

收稿日期:2004-10-28 修回日期:1900-01-01 出版日期:2005-05-10 发布日期:2005-05-10
通讯作者: 周继勇

In vitro Expression and Bioactivity of Chicken Interleukin-2

,,,,,,,

浙江大学动物预防医学研究所病毒与免疫研究室

Received:2004-10-28 Revised:1900-01-01 Online:2005-05-10 Published:2005-05-10

摘要/Abstract

摘要： 将去除信号肽的鸡IL-2基因编码框克隆到原核表达载体pBAD/His B，实现了重组鸡IL-2(rchIL-2)蛋白在大肠杆菌中的高效表达。SDS-PAGE分析显示，表达蛋白的分子量约为18 kD。用rchIL-2为抗原制备了单克隆抗体和多克隆抗体，建立了检测rchIL-2含量的抗原捕获ELISA，探讨了天然chIL-2蛋白的体外表达动力学。非变性条件下纯化的rchIL-2 (0.4 ng) 对Con A活化的鸡T淋巴细胞具有明显的增殖活性，而对鸭及鹅的T淋巴细胞无增殖活性。抗chIL-2多克隆抗体可完全中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白的生物学活性，而单克隆抗体无中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白生物学活性的功能。这些研究结果证实，大肠杆菌表达的rchIL-2及其多克隆抗体拥有生物学功能，而获得的单克隆抗体不具有chIL-2的中和特性。

关键词: 鸡, 白细胞介素-2, 生物学活性, 单克隆抗体, 多克隆抗体, 抗原捕获ELISA

Abstract: In this study, the recombinant chicken interleukin-2 (rchIL-2) was successfully produced in the pBAD/His B expression system induced by L-(+)-arabinose. By SDS-PAGE analysis, the observed molecular weight of rchIL-2 fusion protein without the signal peptide was 18 kD. Monoclonal and polyclonal antibodies specific for rchIL-2 were produced. These antibodies were used to develop a mAb-based antigen capture ELISA (AC-ELISA). Based on the constructed AC-ELISA, in vitro kinetics of endogenous chicken IL-2 production were detected. The soluble rchIL-2 protein purified under native conditions was shown to activate the proliferation of chicken lymphocytes stimulated by Con A for 24 h in a dose-dependent manner. This activity cannot be neutralized by mAbs to chIL-2, but can be neutralized by anti-chIL-2 polyclonal antibody. These results demonstrated that the E.coli-derived rchIL-2 and polyclonal antibody to chIL-2 have bioactivity.

Key words: Chicken, Interleukin-2, Bioactivity, Monoclonal antibody, Polyclonal antibody, Ag capture ELISA

陈吉刚,陈维虎,周继勇,王金勇,齐静,郑肖娟,俞照正,孙红霞. 重组鸡白细胞介素2的诱导表达与生物学活性测定[J]. 中国农业科学, 2005, 38(05): 1034-1039 .

,,,,,,,. In vitro Expression and Bioactivity of Chicken Interleukin-2[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2005, 38(05): 1034-1039 .

0
/ / 推荐

导出引用管理器 EndNote|Reference Manager|ProCite|BibTeX|RefWorks

链接本文: https://www.chinaagrisci.com/CN/

https://www.chinaagrisci.com/CN/Y2005/V38/I05/1034

[1]	束婧婷,单艳菊,姬改革,章明,屠云洁,刘一帆,巨晓军,盛中伟,唐燕飞,李华,邹剑敏. 广西麻鸡m6A甲基转移酶基因表达与肌纤维类型及成肌分化的关系[J]. 中国农业科学, 2022, 55(3): 589-601.
[2]	张亚男,金永燕,庄智威,王爽,夏伟光,阮栋,陈伟,郑春田. 鸡蛋与鸭蛋的蛋壳力学特性、超微结构及蛋壳组分的比较[J]. 中国农业科学, 2022, 55(24): 4957-4968.
[3]	屠云洁,姬改革,章明,刘一帆,巨晓军,单艳菊,邹剑敏,李华,陈智武,束婧婷. 鸡Wnt3a的SNPs筛选及其与皮肤毛囊密度性状关联分析[J]. 中国农业科学, 2022, 55(23): 4769-4780.
[4]	黄勋和,翁茁先,李威娜,王庆,何丹林,罗威,张细权,杜炳旺. 中国地方品种黄鸡线粒体DNA D-loop遗传多样性研究[J]. 中国农业科学, 2022, 55(22): 4526-4538.
[5]	王哲鹏,周雯馨,贺俊锡,虎巧燕,赵家悦. 胆囊收缩素A型受体基因序列变异和表达与略阳乌鸡饲料转化率的关联性研究[J]. 中国农业科学, 2022, 55(22): 4539-4549.
[6]	郭军,王克华,韩威,窦套存,王星果,胡玉萍,马猛,曲亮. 42日龄如皋黄鸡体重间接遗传效应分析[J]. 中国农业科学, 2022, 55(19): 3854-3861.
[7]	贾雅婷,胡慧慧,翟亚军,赵冰,何坤,潘玉善,胡功政,苑丽. 核蛋白H-NS调控多重耐药鸡大肠埃希菌IncFⅡ质粒接合转移的分子机制[J]. 中国农业科学, 2022, 55(18): 3675-3684.
[8]	王雪洁,邢爽,赵少猛,周莹,厉秀梅,柳清秀,马丹丹,张敏红,冯京海. 热应激对肉鸡回肠菌群的影响因素研究[J]. 中国农业科学, 2022, 55(17): 3450-3460.
[9]	张冯禧,肖琦,朱家平,尹力鸿,赵霞玲,严明帅,徐晋花,温立斌,牛家强,何孔旺. 非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体制备、鉴定及阻断ELISA方法的建立[J]. 中国农业科学, 2022, 55(16): 3256-3266.
[10]	魏天,王成宇,王凤杰,李忠鹏,张芳毓,张守峰,扈荣良,吕礼良,王永志. 非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体制备及线性抗原表位定位[J]. 中国农业科学, 2022, 55(15): 3062-3070.
[11]	丁鹏,仝月月,刘会超,尹鑫,刘将军,贺喜,宋泽和,张海涵. 黄羽肉鸡胚期卵黄微生物动态变化及对早期肠道微生物定殖的影响[J]. 中国农业科学, 2022, 55(14): 2837-2849.
[12]	陈志敏,常文环,郑爱娟,蔡辉益,刘国华. 饲粮中添加膨化羽毛粉对肉鸡生长性能、屠宰性能和血清生化指标的影响[J]. 中国农业科学, 2022, 55(13): 2643-2653.
[13]	张宁波,韩照清,金太花,庄桂玉,李炯奎,郑全胜,李永洙. 琅琊鸡及其配套系蛋壳质量、钙代谢生化指标和钙结合蛋白CaBP-D28k mRNA表达的比较[J]. 中国农业科学, 2021, 54(9): 2017-2026.
[14]	束婧婷,姬改革,单艳菊,章明,巨晓军,刘一帆,屠云洁,盛中伟,唐燕飞,蒋华莲,邹剑敏. IGF1-PI3K-Akt信号通路相关基因在黄羽肉鸡肌肉和肝脏中的表达[J]. 中国农业科学, 2021, 54(9): 2027-2038.
[15]	王光宇,李晴,唐文倩,王虎虎,徐幸莲,邱伟芬. nuoB对莓实假单胞菌生理特性及在冷鲜鸡肉中致腐能力的影响[J]. 中国农业科学, 2021, 54(8): 1761-1771.

重组鸡白细胞介素2的诱导表达与生物学活性测定

In vitro Expression and Bioactivity of Chicken Interleukin-2

PDF

赞

可视化

被引次数

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

Metrics

本文评价

推荐阅读 0