中国农业科学 ›› 2004, Vol. 37 ›› Issue (07): 987-987 .

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苏云金芽孢杆菌cry基因芯片检测方法的研究

刘旭光,宋福平,文思远,王升启,黄大昉,张杰   

  1. @刘旭光$中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室!北京100094;连云港师范高等专科学校初教系,连云港222206 @宋福平$中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室!北京100094 @文思远$军事医学科学院放射医学研究所/全军生物芯片重点实验室!北京100850 @王升启$军事医学科学院放射医学研究所/全军生物芯片重点实验室!北京100850 @黄大昉$中国农业科学院生物技术研究所!北京100081 @张杰$中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害
  • 出版日期:2004-07-20 发布日期:2004-07-20

  • Online:2004-07-20 Published:2004-07-20

摘要: 建立了一种不经PCR扩增而直接应用寡核苷酸芯片从苏云金芽孢杆菌总DNA中检测cry基因的方法。对探针长度、浓度、总DNA含量、标记方法以及灵敏度等条件进行了研究。结果表明,用高浓度Klenow酶随机标记高浓度的总DNA与寡核苷酸探针(40~50mer、40μmol·L-1)杂交可用于检测Bt菌株中含有的cry基因;不同长度探针之间对杂交信号的影响存在显著性差异(P<0.01),而不同浓度的探针之间没有显著性差异。此方法的其它条件为杂交温度42℃、时间3h;检测的样品总DNA的灵敏度约为2.5μg;标记产物杂

关键词: 寡核苷酸芯片, 苏云金芽孢杆菌, cry基因, 高浓度Klenow片段酶标记法, 杂交