卡氏住白细胞虫rDNAITS-2的PCR扩增与测序

doi:10.3864/j.issn.0578-1752.030518

中国农业科学 ›› 2003, Vol. 36 ›› Issue (5): 573-576 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.030518

卡氏住白细胞虫rDNAITS-2的PCR扩增与测序

李国清,薛红,朱兴全

华南农业大学兽医学院

出版日期:2003-05-20 发布日期:2003-05-20

华南农业大学兽医学院

Published:2003-05-20 Online:2003-05-20

摘要/Abstract

摘要： 运用PCR方法扩增了卡氏住白细胞虫rDNA的ITS 2及部分 5 .8S和 2 8S序列 (ITS2 +) ,并对该序列进行了克隆和测序。采用巨型裂殖体为材料 ,并根据SaccharomycescerevisiaerDNA中的 5 .8S、2 8S保守序列所设计的通用引物ITS3、ITS4 ,进行了虫体ITS2 +的PCR扩增 ,将所扩增片段纯化后成功地克隆于 pGEM Teasy和PMD18 T载体的T T窗口。经双向自动测序显示 ,该ITS2 +片段的大小为 2 70bp ;经NCBIBlast联机检索 ,结果显示 ,所扩片段中 5 .8S序列与S .cerevisiae的 5 .8S序列有部分相同 ,而ITS 2序列为虫体所特有 ;同时经wDNA SIS软件分析 ,显示该ITS 2序列与S .cerevisiae间同源性相对较远 ,而与柔嫩艾美耳球虫间同源性相对较近 ,故而本试验中所测序列为卡氏住白细胞虫的ITS 2特有序列。

关键词: 卡氏住白细胞虫, ITS-2, PCR, 克隆, 测序

Key words: NULL

李国清,薛红,朱兴全. 卡氏住白细胞虫rDNAITS-2的PCR扩增与测序[J]. 中国农业科学, 2003, 36(5): 573-576 .

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