中国农业科学 ›› 2000, Vol. 33 ›› Issue (6): 88-94 .

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鸡bcl-2表达质粒的构建及其对转染细胞凋亡的影响

张书霞,步志高,陈万芳   

  1. 南京农业大学动物医学院!南京210095
  • 出版日期:2000-06-20 发布日期:2000-06-20

  1. 南京农业大学动物医学院!南京210095
  • Online:2000-06-20 Published:2000-06-20

摘要: 构建了 CMV驱动及牛生长激素 poly A加尾信号修饰的 bcl- 2 c DNA真核表达质粒p CDCB1。随后 ,采用脂质体转染方法 ,将扩增并纯化的 p CDCB1转染至培养的 SPF鸡胚次代单层成纤维细胞 (CEF)内 ,96h后收集全部贴壁及上清脱落细胞 ,用 Dotblot检测 bcl- 2的表达 ,用流式细胞术测定其细胞凋亡率。结果 ,p CDCB1转染后 96h,bcl- 2在 CEF中呈高度表达 ;CEF平均凋亡率为 1 .1 4% ,明显低于转染空白载体质粒的对照组 7.64%的凋亡率 ,DNA合成期 (S期 )细胞为 2 1 .58% ,也低于对照组。结果证实鸡 bcl- 2 的表达可显著抑制体外培养 CEF凋亡进程 ,其效应与细胞 DNA合成和增殖无关。

关键词: bcl-2, cDNA, 真核表达质粒, 转染, 细胞凋亡