小麦3种病毒病BSMV、BYDV-PAV、WYMV及WBD植原体病害的多重PCR同步检测

doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.09.013

中国农业科学 ›› 2008, Vol. ›› Issue (9): 2663-2669 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.09.013

小麦3种病毒病BSMV、BYDV-PAV、WYMV及WBD植原体病害的多重PCR同步检测

西北农林科技大学生命科学学院

收稿日期:2007-09-17 修回日期:2007-12-04 出版日期:2008-09-01 发布日期:2008-09-01
通讯作者: 吴云锋

西北农林科技大学生命科学学院

Received:2007-09-17 Revised:2007-12-04 Online:2008-09-01 Published:2008-09-01

摘要/Abstract

摘要：

【目的】通过对检测小麦病毒病和植原体病害的多重PCR体系各成分和循环参数进行摸索和优化，建立了一种同时检测大麦条纹花叶病毒（barley stripe mosaic virus，BSMV）、大麦黄矮病毒PAV株系（barley yellow dwarf virus，BYDV-PAV）、小麦黄花叶病毒（wheat yellow mosaic virus，WYMV）和小麦蓝矮植原体（wheat blue dwarf，WBD）的多重PCR技术体系。【方法】运用根据3种病毒核苷酸保守区序列设计的特异性引物对、根据WBD植原体核糖体蛋白基因序列设计特异性引物对rpF1/R1，从影响多重PCR（M-PCR）扩增的引物浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶浓度、dNTPs浓度、退火温度等方面进行多重PCR体系的优化。【结果】成功的在一个体系中对BSMV、BYDV-PAV、WYMV和WBD复合侵染的小麦材料进行多重PCR扩增，得到503、600、898、1 240 bp 4条特异性大小与试验设计相符的条带，建立了同时检测4种病原的多重PCR体系。【结论】该体系实现了植原体DNA病原和病毒RNA病原的同时检测，体现了多重PCR的优越性。

关键词: 小麦, 多重PCR, 病毒, 植原体

. 小麦3种病毒病BSMV、BYDV-PAV、WYMV及WBD植原体病害的多重PCR同步检测[J]. 中国农业科学, 2008, (9): 2663-2669 .

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