以合成肽为抗原建立口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测ELISA试剂盒#br#

doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.018

中国农业科学 ›› 2010, Vol. 43 ›› Issue (6): 1242-1247 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.018

以合成肽为抗原建立口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测ELISA试剂盒#br#

杨继飞,杨苏珍,杨艳艳,职爱民,赵东,郅玉宝,邢广旭,邓瑞广,柴书军,张改平#br#

（河南省农业科学院/河南省动物免疫学重点实验室）

收稿日期:2009-08-17 修回日期:2009-11-07 出版日期:2010-03-15 发布日期:2010-03-15

Development of an ELISA for Detection of Foot-and-Mouth Nonstructural Protein Antibody with Synthetic Peptides#br#

YANG Ji-fei, YANG Su-zhen, YANG Yan-yan, ZHI Ai-min, ZHAO Dong, ZHI Yu-bao, XING Guang-xu, DENG Rui-guang, CHAI Shu-jun, ZHANG Gai-ping#br#

（河南省农业科学院/河南省动物免疫学重点实验室）

Received:2009-08-17 Revised:2009-11-07 Published:2010-03-15 Online:2010-03-15

摘要/Abstract

摘要：

【目的】建立合成多肽抗原检测FMD NSP 抗体的 ELISA 方法。【方法】固相法合成特异性FMDV NSP B细胞表位肽,将其偶联在BSA载体蛋白上,作为抗原包被在ELISA板上,制备检测抗FMDV NSP抗体的ELISA 试剂盒,并对该试剂盒进行方法考核。【结果】抗原包被浓度选择2.5μg•mL-1; 检测199 份血清标本,与美国UBI商品试剂盒符合率达到96.48%,与国产3ABC ELISA比较,符合率为97.48%,显示极好的一致性。【结论】该合成肽ELISA试剂盒可以用以检测NSP抗体,从而鉴别FMD的自然感染与疫苗免疫,试剂盒特异性强,重复性好、稳定性高,操作简便。

关键词: FMDV')">FMDV, ELISA, 合成肽

Abstract:

【Objective】 Developing an ELISA based on a synthetic peptide detecting foot-and-mouth disease virus(FMDV) nonstructural proteins (NSPs) antibody. 【Method】 A specific peptide according to FMDV NSPs B-cell epitopes was synthesized by a solid-phase method, and was conjugated with carrier protein BSA. An ELISA for detecting FMDV NSPs antibody was developed by using the conjugating protein as the coating antigen. 【Result】 The optimal coating concentration of the antigen was determined as 2.5μg•mL-1; The results of comparison of the assay with UBI NSP ELISA kit and national commercial 3ABC ELISA kit in detection of 199 serum samples showed that they were very coincident, and the agreement rate of them reached 96.48% and 97.48, respectively. 【Conclusion】 The developed ELISA using the synthetic peptide as coating antigen is specific, reproducible, stable and easy, and can be used to differentiate FMDV infected animals from immunized animals.

Key words: FMDV')">FMDV, ELISA, Synthetic peptide

杨继飞,杨苏珍,杨艳艳,职爱民,赵东,郅玉宝,邢广旭,邓瑞广,柴书军,张改平
. 以合成肽为抗原建立口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测ELISA试剂盒#br# [J]. 中国农业科学, 2010, 43(6): 1242-1247 .

YANG Ji-fei,YANG Su-zhen,YANG Yan-yan,ZHI Ai-min,ZHAO Dong,ZHI Yu-bao,XING Guang-xu,DENG Rui-guang,CHAI Shu-jun,ZHANG Gai-ping
. Development of an ELISA for Detection of Foot-and-Mouth Nonstructural Protein Antibody with Synthetic Peptides#br# [J]. Scientia Agricultura Sinica, 2010, 43(6): 1242-1247 .

[1]	高云洁, 郭若男, 陈春文, 段祎凡, 张镇均, 聂蝉蝉, 李梦雨, 王慧, 冯婷婷, 崔莹莹, 党光辉, 刘思国. 羊副结核分枝杆菌间接ELISA抗体检测方法的建立与初步应用[J]. 中国农业科学, 2026, 59(3): 655-667.
[2]	洪润婧, 周红, 蔺辉星, 范红结. 胞内劳森菌夹心ELISA检测方法的建立与应用[J]. 中国农业科学, 2025, 58(5): 1032-1042.
[3]	乔英翠, 王薄毓, 王倩, 赵丹, 郭巍, 宁文烁, 常梦颖, 王海, 陆秀君. 暗黑鳃金龟HpvATPase B克隆、表达及与Bt Cry8Ea3毒素结合特性[J]. 中国农业科学, 2025, 58(10): 1947-1957.
[4]	张从钺, 周红, 蔺辉星, 范红结. 猪增生性肠病间接ELISA抗体检测试剂盒的研制与应用[J]. 中国农业科学, 2024, 57(16): 3283-3293.
[5]	张鹏云, 陈敏, 刘明星, 周红, 蔺辉星, 范红结. 副猪嗜血杆菌间接ELISA抗体检测试剂盒的研制与应用[J]. 中国农业科学, 2023, 56(8): 1606-1614.
[6]	郭奎, 张泽楠, 王垚鑫, 李帅杰, 初晓雨, 郭巍, 胡哲, 王晓钧. 基于单克隆抗体的非洲马瘟病毒间接ELISA抗体检测方法的建立与应用[J]. 中国农业科学, 2023, 56(16): 3237-3246.
[7]	郭奎, 张泽楠, 李帅杰, 初晓雨, 王垚鑫, 郭巍, 胡哲, 王晓钧. 致马属动物流产沙门氏菌通用型间接ELISA抗体检测方法的建立与应用[J]. 中国农业科学, 2023, 56(12): 2421-2430.
[8]	李志玲,李香菊,崔海兰,于海燕,陈景超. 牛筋草EPSPS酶联免疫试剂盒的研发及应用[J]. 中国农业科学, 2022, 55(24): 4851-4862.
[9]	张冯禧,肖琦,朱家平,尹力鸿,赵霞玲,严明帅,徐晋花,温立斌,牛家强,何孔旺. 非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体制备、鉴定及阻断ELISA方法的建立[J]. 中国农业科学, 2022, 55(16): 3256-3266.
[10]	梁雨欣,吴建祥,李小宇,张春雨,侯吉超,周雪平,王永志. 马铃薯Y病毒衣壳蛋白抗原表位分析及其快速ELISA检测方法的建立[J]. 中国农业科学, 2021, 54(6): 1154-1162.
[11]	魏晓,张奇,张文,李慧,李培武. 农产品中黄曲霉毒素产毒菌标识性分子大容量反应体系提高ELISA灵敏度[J]. 中国农业科学, 2020, 53(7): 1473-1481.
[12]	胡慧敏,潘雪峰,杨恒,陈晨,陈银基. 基于R5 ELISA和RP-HPLC法的小麦发芽过程中主要致敏蛋白含量变化[J]. 中国农业科学, 2020, 53(6): 1247-1255.
[13]	王芳，冯宇，张阁，蒋卉，朱良全，丁家波. 牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测方法的建立[J]. 中国农业科学, 2016, 49(9): 1818-1825.
[14]	沈林林，邹文超，高芳銮，詹家绥. 采用多基因联合方法鉴定福建长乐和福清产区马铃薯Y病毒株系组成[J]. 中国农业科学, 2016, 49(20): 3918-3926.
[15]	陈浙，宋革，周雪平，吴建祥. 西瓜花叶病毒（WMV）单克隆抗体的制备及其应用[J]. 中国农业科学, 2016, 49(14): 2711-2724.

以合成肽为抗原建立口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测ELISA试剂盒#br#

Development of an ELISA for Detection of Foot-and-Mouth Nonstructural Protein Antibody with Synthetic Peptides#br#

PDF

赞

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

Metrics

本文评价

推荐阅读 0