中国农业科学 ›› 2001, Vol. 34 ›› Issue (6): 619-625 .

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甜菜夜蛾GOBP2基因的克隆及序列测定

王桂荣,郭予元,徐广,吴孔明   

  1. 中国农业科学院植物保护研究所
  • 出版日期:2001-06-20 发布日期:2001-06-20

  1. 中国农业科学院植物保护研究所
  • Online:2001-06-20 Published:2001-06-20

摘要: 比较已报道的 5种昆虫的 GOBP2基因序列,设计了一对简并引物,以甜菜夜蛾 Spodoptera exigua的触角cDNA为模板进行PCR扩增,获得了一条400bp左右的特异性条带。将以上片段克隆到T-easy载体上,获得重组子GOBP2Sexi,序列测定和结构分析结果表明,GOBP2Sexi阅读框全长426bp,编码141个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为16.07ku和5.09。另外,序列中有6个保守的半胱氨酸位点,具有气味结合蛋白的典型特征。同时以基因组 DNA为模板进行PCR扩增,得到了一条 2kb左右的特异性条带,同样克隆到 T-easy载体上进行测序,结果表明,在该蛋白的第22和第23个氨基酸之间及第82和第83个氨基酸之间分别插入了一个160bp和1403bp的内含子。Northern杂交结果表明,GOBP2基因在甜菜夜蛾触角中特异性表达,并且在雌雄蛾触角中表达水平相当。该基因已在GenBank/EMBL中登记,序列号为AJ294809。

关键词: 甜菜夜蛾, 触角, 普通气味结合蛋白, 基因克隆

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