家蚕TCTP基因的克隆、分析及其表达

doi:10.3864/j.issn.0578-1752.at-2006-7731

中国农业科学 ›› 2007, Vol. 40 ›› Issue (8): 1809-1816 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.at-2006-7731

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家蚕TCTP基因的克隆、分析及其表达

周博,黄健华,贾世海,张勇,黄勇平

中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所

收稿日期:2006-06-23 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-08-10 发布日期:2007-08-10

Molecular Cloning, Analysis and Prokaryotic Expression of the Translationally Controlled Tumor Protein Gene in Bombyx mori

中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所

Received:2006-06-23 Revised:1900-01-01 Published:2007-08-10 Online:2007-08-10

摘要/Abstract

摘要： 【目的】在家蚕基因表达谱研究中鉴定了近4万个特异的SAGE标签，为了研究这些标签所对应基因的功能，选择了其中一个SAGE标签，探索这个SAGE标签对应的基因序列，表达特征以及相关的功能。【方法】在SAGE结合GLGI结果的基础上，利用5’RACE获得基因的全长，根据不同物种间该基因的同源性来构建系统发生树，通过PCR检测该基因在家蚕不同时期、不同组织中的表达特征，并在原核表达系统中表达该基因。【结果】从cDNA中获得了家蚕TCTP基因的全长序列，构建了不同物种间TCTP的系统发生树，PCR结果表明TCTP基因在家蚕的各个时期、各个组织中都稳定的表达，并且成功的在原核表达系统中表达了该基因。【结论】从cDNA中获得了TCTP基因的全长序列，并且成功在原核系统中表达，证明了通过笔者的实验方法能够获得新的基因；系统发生树显示亲缘性越近的物种TCTP间的同源性越高；家蚕TCTP基因在家蚕生命的各个时期、各个组织都有重要的生物学功能；这些工作为进一步研究其具体功能奠定了基础。

关键词: 家蚕, TCTP, 同源性, 系统发生树, 原核表达

Abstract: In order to reveal the function of TCTP gene in Bombyx mori, we cloned the TCTP gene using 5’RACE depending on the tag get from SAGE and the result of GLGI. To compare the homology the TCTP in Bombyx mori with other species’, we constructed a primary phylogenic tree. On the other hand, we amplify TCTP gene from various stage or tissue of Bombyx mori to learn the expression of TCTP gene in the insect. Furthermore, to confirm the exact function of TCTP, we get the recombinant protein of it by E. coli expression system.

Key words: Bombyx mori, TCTP, tag, Homolog analysis, Phylogenetic tree

周博,黄健华,贾世海,张勇,黄勇平. 家蚕TCTP基因的克隆、分析及其表达[J]. 中国农业科学, 2007, 40(8): 1809-1816 .

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家蚕TCTP基因的克隆、分析及其表达

Molecular Cloning, Analysis and Prokaryotic Expression of the Translationally Controlled Tumor Protein Gene in Bombyx mori

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