库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究

doi:10.3864/j.issn.0578-1752.030516

中国农业科学 ›› 2003, Vol. 36 ›› Issue (5): 561-566 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.030516

库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究

牛建新,刘连科,王小兵,覃伟铭

石河子大学新疆作物高产研究中心

出版日期:2003-05-20 发布日期:2003-05-20

石河子大学新疆作物高产研究中心

Published:2003-05-20 Online:2003-05-20

摘要/Abstract

摘要： 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对总RNA提取方法进行了研究 ,从中筛选出了适合库尔勒香梨总RNA的提取方法。结果表明 ,要获得良好的RT PCR扩增 ,RT体系中dNTPs浓度、互补引物、AMV、模板的浓度要分别达到 0 .1mmol·L-1、0 .2 μmol·L-1、0 .0 5U·μl-1、0 .0 1μg·μl-1以上。此外 ,使用RNasin能有效抑制RT体系中RNase对病毒RNA的降解作用 ,可使RT过程顺利进行 ;PCR体系中dNTPs浓度至少要达到 0 .1mmol·L-1,0 .2～ 0 .3mmol·L-1可以获得最佳的扩增效果 ;TaqE浓度要达到 0 .0 15U·μl-1以上 ;引物浓度适宜范围 0 .3～ 0 .7μmol·L-1;Mg2 + 要达到 1.2 6mmol·L-1以上。

关键词: 库尔勒香梨, 梨脉黄病毒, RT-PCR

Key words: NULL

牛建新,刘连科,王小兵,覃伟铭. 库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究[J]. 中国农业科学, 2003, 36(5): 561-566 .

[1]	董钰, 吴千, 冯萱, 郑银英, 崔百明. 解淀粉欧文氏菌新质粒pEA60通过调节毒力因子的合成增强菌株的致病力[J]. 中国农业科学, 2026, 59(5): 996-1007.
[2]	许朵朵, 杜倩倩, 赵理想, 栗燕, 黄淦, 李永华, 逯久幸. 牡丹AP2/ERF转录因子的全基因组分析[J]. 中国农业科学, 2025, 58(23): 5031-5045.
[3]	林彦, 郑玲玲, 田嘉, 温玥, 陈晨, 王磊. 基于转录组和蛋白质组揭示库尔勒香梨萼片脱落的分子机制[J]. 中国农业科学, 2025, 58(18): 3744-3765.
[4]	王龙, 王军, 蒋静, 刘浩, 刘德召, 李久生. 滴灌不同用量的氮钾肥对土壤盐分及南疆香梨产量、品质的影响[J]. 中国农业科学, 2025, 58(17): 3473-3487.
[5]	兖攀, 王振东, 邓永辉, 陈奇凌, 郑强卿. 库尔勒香梨的光能截获率及冠层结构优化[J]. 中国农业科学, 2024, 57(5): 965-979.
[6]	任彩霞, 刘琳, 刘升学, 卜方迪, 向本春, 郑银英, 崔百明. 梅病毒A新疆蟠桃分离物的全基因组序列分析与侵染性克隆构建[J]. 中国农业科学, 2024, 57(19): 3810-3822.
[7]	肖涛, 李辉, 罗韦, 叶涛, 余欢, 陈友波, 石钰仕, 赵德鹏, 吴芸. 基于转录组测序筛选鸡蛋绿壳性状相关基因[J]. 中国农业科学, 2023, 56(8): 1594-1605.
[8]	苏琦, 汤亚飞, 佘小漫, 蓝国兵, 于琳, 吴正伟, 李正刚, 何自福. 广东省蒲瓜病毒种类鉴定及多重RT-PCR检测方法的建立[J]. 中国农业科学, 2023, 56(23): 4684-4695.
[9]	廖富荣, 陈红运, 沈建国, 方志鹏, 黄蓬英, 陈青, 林玲玲, 洪钧. 香石竹斑驳病毒属简并引物RT-PCR检测方法的建立[J]. 中国农业科学, 2023, 56(12): 2288-2301.
[10]	王一丹,杨发龙,陈弟诗,向华,任玉鹏. 猪腹泻病毒一步法多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测法的建立及应用[J]. 中国农业科学, 2023, 56(1): 179-192.
[11]	谢丽雪,张小艳,张立杰,郑姗,李韬. 侵染西番莲的东亚西番莲病毒全基因组序列特征及TC-RT-PCR检测技术[J]. 中国农业科学, 2022, 55(22): 4408-4418.
[12]	许建建,王艳娇,段玉,马志敏,宾羽,周常勇,宋震. 柑橘脉突病毒基因组全长cDNA克隆及其侵染性鉴定[J]. 中国农业科学, 2020, 53(18): 3707-3715.
[13]	丁艳娟,刘永康,罗雨嘉,邓颖梅,徐红星,唐斌,徐彩娣. 褐飞虱GSK-3调控糖原与海藻糖代谢的潜在功能[J]. 中国农业科学, 2019, 52(7): 1237-1246.
[14]	万东莉,侯向阳,丁勇,任卫波,王凯,李西良,万永青. 磷胁迫下羊草的响应及磷响应相关基因表达分析[J]. 中国农业科学, 2019, 52(23): 4215-4227.
[15]	汤亚飞,裴凡,李正刚,佘小漫,于琳,蓝国兵,邓铭光,何自福. 基于小RNA深度测序技术鉴定侵染广东辣椒的病毒种类[J]. 中国农业科学, 2019, 52(13): 2256-2267.

库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究

PDF

赞

可视化

被引次数

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

Metrics

本文评价

推荐阅读 0