中国农业科学 ›› 2002, Vol. 35 ›› Issue (6): 650-653 .

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对鞘翅目害虫高毒力Bt基因cry3Aa7的分离克隆及表达研究

张杰,宋福平,李长友,陈中义,檀建新,黄大昉   

  1. 中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室
  • 出版日期:2002-06-20 发布日期:2002-06-20

  1. 中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室
  • Online:2002-06-20 Published:2002-06-20

摘要: 从国内分离的对鞘翅目叶甲科害虫高毒力的Bt菌株中克隆了 3.0kbcry3Aa基因大片段 ,完成了该片段的亚克隆和全序列测定。该基因编码区为 1932bps,编码的蛋白质由 6 4 4个氨基酸残基组成 ,分子量 73.1ku ,等电点为 pH5 .16 5 ,为弱酸性蛋白。该蛋白中Ser、Leu、Thr含量最高 ,分别为 8.2 2 %、8.0 7%和 7.76 %。通过穿梭载体将该基因导入Bt无晶体突变株中 ,获得工程菌Biot2 0 5。cry3Aa7基因在其中能正常表达 ,并形成扁方形晶体。工程菌Biot2 0 5对榆蓝叶甲 (Pyrrhaltaaenescens)校正死亡率为 86 .2 1%。该基因序列已在EMBL、GenBank中登记 ,并被国际Bt δ 内毒素基因命名委员会正式命名为cry3Aa7。

关键词: 鞘翅目害虫, Bt, cry3Aa7基因, 基因克隆, 杀虫活性

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