中国农业科学 ›› 1997, Vol. 30 ›› Issue (06): 61-66 .

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Ri质粒介导TMV和CMV外壳蛋白基因转化烟草的研究

刘伟华,任如意,徐香玲,李集临   

  1. 哈尔滨师范大学生物系,哈尔滨 150080 牡丹江师范学院生物系
  • 出版日期:1997-11-20 发布日期:1997-11-20

  1. 哈尔滨师范大学生物系,哈尔滨 150080 牡丹江师范学院生物系
  • Online:1997-11-20 Published:1997-11-20

摘要: 利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)Ri质粒介导的二元载体法,将pBTC-8质粒上的TMV-cp和CMV-cp基因导入烟草中。采用烟草叶片与农杆菌菌液共培养的方法,诱导出毛状根,经卡那霉素抗性筛选,进一步诱导出愈伤组织并分化再生出完整植株,转化根和植株表现卡那霉素抗性并检测到冠瘿碱的存在。PCR扩增和DNA斑点杂交的结果证明了TMV和CMV外壳蛋白基因已导入到烟草中,同时利用斑点免疫结合法的血清学实验,检测到转化株中有TMV-cp和CMV-cp基因的产物,从而进一步证明了TMV-cp和CMV-cp基因在转化的烟草中得到表达。

关键词: Ri质粒, TMV-cp和CMV-cp基因, 转化, 烟草