中国农业科学 ›› 2023, Vol. 56 ›› Issue (14): 2812-2827.doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2023.14.015
收稿日期:
2022-05-04
接受日期:
2022-12-29
出版日期:
2023-07-16
发布日期:
2023-07-21
通信作者:
联系方式:
韩晶,E-mail:han_jing97@163.com。。王小琪,E-mail:xqwang@genetics.ac.cn。韩晶与王小琪为同等贡献作者。
基金资助:
HAN Jing1,2(), WANG XiaoQi2(
), DUAN ZiYuan2(
)
Received:
2022-05-04
Accepted:
2022-12-29
Published:
2023-07-16
Online:
2023-07-21
摘要:
【目的】研究日粮中含有10%柠条(Caragana korshinskii Kom.,CK)对滩羊血脂、免疫指标及瘤胃、结肠菌群的影响,为CK替代部分饲料饲喂滩羊提供理论依据。【方法】将12只平均初始体重相似的四月龄滩羊母羔(27.5±3.32 kg),随机分为两组,每组6只。对照组(NC)饲喂基础日粮(30%精料和70%苜蓿干草),试验组(CK)用10% CK替代等量苜蓿干草,自由饮水。两组日粮营养水平相似,CK的纤维含量略高于苜蓿。预试期10 d,正试期60 d。试验结束后采集颈静脉血样品用于检测血液生化指标(血脂因子及免疫因子);采集瘤胃液、结肠内容物,提取DNA,并利用16S rRNA测序检测瘤胃、结肠内菌群群落多样性,并通过重组质粒,比如月形单胞菌属(Selenomona)、普雷沃氏菌属(Prevotella)、布劳特氏菌属(Blautia)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)、拟杆菌属(Bacteroides),构建标准曲线,利用实时荧光定量PCR(qPCR)对重要菌属进行绝对定量检测。【结果】正试期结束时,两组滩羊的末重和日均采食量相似,无显著性差异;检测发现,相比于NC组,CK组滩羊体内脂质消化吸收和代谢状况的相关指标呈现不同程度降低,如CK组血清甘油三酯(TRIG)含量显著降低(P<0.05),极低密度脂蛋白(VLDL)含量极显著降低(P<0.01),低密度脂蛋白(LDL)含量有降低的趋势(0.05<P<0.1)。炎性因子和脂解因子白介素6(IL-6)浓度显著增加(P<0.05),炎性细胞因子干扰素γ(IFN-γ)浓度趋于降低(P=0.058);CK组结肠细菌群落Shannon多样性指数极显著增加(P<0.01),瘤胃细菌群落Chao1指数趋于降低(0.05<P<0.1);CK组瘤胃内颤螺菌属(Oscillospira)相对丰度趋向降低(P=0.07);阿克曼菌属(Akkermansia)相对丰度显著降低(P<0.05);结肠内碳水化合物降解相关菌拟杆菌属、有害菌密螺旋体属(Treponema)的相对丰度趋向降低(P=0.059,P=0.061),与肥胖、便秘、免疫相关的产丁酸菌颤螺菌属的相对丰度显著增加(P<0.05);两组间瘤胃和结肠内细菌群落均在脂质代谢和其他次级代谢产物的生物合成能力上有显著差异(P<0.05)。皮尔森相关性分析表明,TRIG相对丰度与假丁酸弧菌(Pseudobutyrivibrio)等属(降解纤维也是产丁酸)的相对丰度呈显著正相关(P<0.05)。【结论】柠条部分替代苜蓿对滩羊生长性能无显著影响,但可以调节胃肠道菌群结构,通过改变胃肠道细菌菌群的组成降低了滩羊血液中TRIG、LDL和VLDL的浓度,参与了宿主的脂代谢过程。
韩晶, 王小琪, 段子渊. 饲喂柠条对滩羊血清指标及瘤胃、结肠菌群结构的影响[J]. 中国农业科学, 2023, 56(14): 2812-2827.
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表1
日粮组成及营养水平(% 干物质)"
项目 Item | 组别 Group | |
---|---|---|
NC组 NC group | CK组 CK group | |
成分 Ingredient | ||
苜蓿 Alfalfa | 70.0 | 60.0 |
柠条 Caragana korshinskii Kom | 10.0 | |
精料 Commercial concentrate | 30.0 | 30.0 |
合计 Total | 100.0 | 100.0 |
营养水平 Chemical composition | ||
干物质Dry matter | 90.4 | 90.4 |
有机物Organic matter | 88.4 | 89.0 |
粗蛋白质Crude protein | 15.5 | 14.9 |
粗脂肪Ether extract | 2.0 | 2.0 |
酸性洗涤纤维Acid detergent fiber | 31.1 | 32.7 |
中性洗涤纤维Neutral detergent fiber | 49.7 | 51.8 |
总能Gross energy (MJ·kg-1) | 15.8 | 16.0 |
表2
实时荧光定量PCR检测的细菌引物"
菌属 Genus | 引物 Primers(5'to3') | 扩增长度 Amplicon length (bp) | 参考文献 Reference |
---|---|---|---|
月形单胞菌属 Selenomonas | F:TGAGTGAAGAAGGGTTTCGGC | 511 | [ |
R:TTGAGTTTCAGTCTTGCGACCG | |||
瘤胃球菌属 Ruminococcus | F:GAGTGAAGTAGAGGTAAGCGGAATTC | 243 | [ |
R:GCCGTACTCCCCAGGTGG | |||
脱硫弧菌属 Desulfovibrio | F:CCGTAGATATCTGGAGGAACATCAG | 135 | [ |
R:ACATCTAGCATCCATCGTTTACAGC | |||
布劳特氏菌属 Blautia | F:TCTGATGTGAAAGGCTGGGGCTTA | 250 | [ |
R:GGCTTAGCCACCCGACACCTA | |||
拟杆菌属 Bacteroides | F:CTGAACCAGCCAAGTAGCG | 226 | [ |
R:CCGCAAACTTTCACAACTGACTTA | |||
普雷沃氏菌属 Prevotella | F:GGTTCTGAGAGGAAGGTCCCC | 121 | [ |
R:TCCTGCACGCTACTTGGCTG |
表3
NC组和CK组微生物表型的比较"
项目 Item | 瘤胃Rumen | 结肠Colon | ||||
---|---|---|---|---|---|---|
AR组 AR group | BR组 BR group | P值 P value | AG组 AG group | BG组 BG group | P值 P value | |
好氧型Aerobic | 0.033±0.015 | 0.016±0.011 | 0.041 | 0.085±0.073 | 0.075±0.030 | 0.589 |
厌氧型Anaerobic | 0.842±0.025 | 0.880±0.034 | 0.065 | 0.754±0.087 | 0.724±0.025 | 0.394 |
兼性厌氧型Facultatively anaerobic | 0.034±0.025 | 0.025±0.011 | 0.818 | 0.004±0.001 | 0.003±0.001 | 0.394 |
生物膜形成Forms biofilms | 0.051±0.013 | 0.041±0.014 | 0.240 | 0.099±0.084 | 0.067±0.029 | 0.937 |
革兰氏阳性Gram positive | 0.442±0.071 | 0.467±0.097 | 0.818 | 0.635±0.063 | 0.705±0.070 | 0.132 |
革兰氏阴性Gram negative | 0.558±0.071 | 0.533±0.097 | 0.818 | 0.365±0.063 | 0.295±0.070 | 0.132 |
潜在致病性Potentially pathogenic | 0.648±0.072 | 0.638±0.638 | 0.818 | 0.450±0.076 | 0.385±0.050 | 0.180 |
表4
qPCR绝对定量结果(拷贝数)"
菌属 Genus | 瘤胃Rumen | 结肠Colon | ||||
---|---|---|---|---|---|---|
AR组 AR group | BR组 BR group | P值 P value | AG组 AG group | BG组 BG group | P值 P value | |
脱硫弧菌属 Desulfovibrio | 4.75±0.37(×104) | 4.19±0.21(×104) | 0.01 | 3.80±0.20(×103) | 3.83±0.13(×103) | 0.83 |
瘤胃球菌属 Ruminococcus | 6.55±0.82(×106) | 6.77±0.30(×106) | 0.09 | 7.85±0.66(×107) | 7.80±0.38(×107) | 0.64 |
拟杆菌属Bacteroides | 4.18±0.72(×104) | 4.45±0.57(×104) | 0.52 | 7.00±0.26(×106) | 6.88±0.10(×106) | 0.36 |
普雷沃氏菌属 Prevotella | 6.88±0.29(×106) | 7.17±0.35(×106) | 0.19 | 7.22±0.28(×107) | 6.98±0.04(×107) | 0.08 |
月形单胞菌属 Selenomonas | 4.86±0.18(×104) | 5.43±0.42(×104) | 0.02 | 5.38±0.22(×105) | 5.24±0.14(×105) | 0.26 |
布劳特氏菌属 Blautia | 4.77±0.22(×104) | 4.61±0.26(×104) | 0.29 | 5.76±0.14(×105) | 5.49±0.22(×105) | 0.09 |
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