中国农业科学 ›› 2001, Vol. 34 ›› Issue (2): 223-226 .

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谷胱甘肽还原酶基因的表达载体构建及对马铃薯的转化

林久生,王根轩,梅   

  1. 兰州大学
  • 出版日期:2001-02-20 发布日期:2001-02-20

  1. 兰州大学
  • Online:2001-02-20 Published:2001-02-20

摘要: 利用 pGR202和 pBin19两种质粒经过 pBI 222的改建,含有 CaMV35S启动子和 Nos终止子的 CN区DNA片段与 pBin19的 Bin区 DNA片段的不对称连接和目的基因 GR的 cDNA重组于真核表达双元载体三步亚克隆,筛选出一正向插入的谷胱甘肽还原酶基因的真核表达双元载体质粒pBin-CN-GR。再利用此质粒转化的农杆菌LBA4404进行马铃薯的遗传转化.并分化出卡那霉素抗性苗。过氧化物同工酶和酯酶同工酶谱带显示转化材料与对照之间存在显著的差异.表明转化材料的基因表达发生了变化。对转化影响因素的研究发现培养基的组成成分、选择压(Km)添加浓度及加入时机是影响转化率的重要因素。

关键词: 马铃薯, 根癌农杆菌, 表达载体, 基因转化

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