中国农业科学 ›› 1994, Vol. 27 ›› Issue (03): 7-11 .

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从水稻叶绿体基因文库中快速克隆叶绿体基因

程,奇,于晓兰,章力建,沈桂芳   

  1. 中国农业科学院生物技术研究中心,北京 100081
  • 出版日期:1994-05-20 发布日期:1994-05-20

  1. 中国农业科学院生物技术研究中心,北京 100081
  • Online:1994-05-20 Published:1994-05-20

摘要: 利用多聚酶链式反应(PCR)法,从水稻的叶绿体基因文库中克隆并鉴定了两个含强启动子的叶绿体光调控基因psbA和rbcL。根据已发表的水稻叶绿体基因组的序列,分别设计合成了psbA基因两端的引物5'ttccggggtcgactcccgggcaacc3'和引物5'taactgaattcagaatag3',以及rbcL基因两端的引物5'tcaagctttaggtatttccactc3'和引物5'acgtcgacaagtctcatgatcgtatc3',以水稻叶绿体基因文库的cpDNA为模板,进行PCR反应。电泳回收所需片断,酶切后再将它们克隆到pUC19载体上,并对它们进行了DNA序列和限制性酶切位点的分析。

关键词: PCR, psbA, rbcL, 克隆, 序列分析

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