家蚕Bm595的表达、组织分布及亚细胞定位

doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.03.028

中国农业科学 ›› 2010, Vol. 43 ›› Issue (3): 648-654 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.03.028

家蚕Bm595的表达、组织分布及亚细胞定位

王帅玉,盛清,吕正兵,陈健,聂作明,王丹,刘立丽,沈红丹,舒建洪,陈剑清,吴祥甫,张耀洲

（浙江理工大学生命科学学院生物化学所）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2010-02-10 发布日期:2010-02-10
通讯作者: 张耀洲

Expression, Tissue Distribution and Subcellular Localization of Bm595 from Silkworm (Bombyx mori)

WANG Shuai-yu, SHENG qing, Lü Zheng-bing, CHEN Jian, NIE Zuo-ming, WANG Dan, LIU Li-li, SHEN Hong-dan, SHU Jian-hong, CHEN Jian-qing, WU Xiang-fu, ZHANG Yao-zhou

（浙江理工大学生命科学学院生物化学所）

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2010-02-10 Published:2010-02-10
Contact: ZHANG Yao-zhou

摘要/Abstract

摘要： 【目的】从家蚕蛹期cDNA文库中获得一条新基因Bm595,分析Bm595在家蚕体内的表达和定位情况。【方法】利用生物信息学分析Bm595序列,并构建重组表达质粒在大肠杆菌中诱导表达,以纯化的融合蛋白抗原,制备多克隆抗体。用荧光定量PCR和Western blot方法分析Bm595基因在家蚕各组织中的分布。用免疫细胞化学的方法研究Bm595蛋白的定位情况。【结果】Bm595在五龄幼虫的转录水平最高,卵中最低。Bm595在家蚕五龄幼虫各组织中的转录水平由高到低依次为：睾丸、丝腺、肠、头、卵巢、脂肪体、表皮、气管。在表达水平方面,睾丸的表达量最高,其次是丝腺和头,脂肪体有较明显的表达。以家蚕Bm5细胞进行免疫细胞化学试验,Bm595主要分布于细胞核内。【结论】在mRNA、蛋白质表达和细胞水平对Bm595进行初步表达分析和定位分析,为进一步研究该蛋白在家蚕中的功能提供重要依据。

关键词: Bm595, 组织分布, 亚细胞定位

Abstract: 【Objective】 In screening the pupa cDNA library, a novel gene Bm595 was identified, the tissue distribution and localization of Bm595 were analyzed in silkworm. 【Method】 The recombinant plasmid was transformed into E.coli BL 21 which were induced with IPTG. The purified fusion protein was used to immune a rabbit and the polyclonal antibody was prepared. The tissue distribution of Bm595 was analyzed by real-time PCR and Western blot. 【Result】 The quantitative real-time PCR results indicated that the transcription level of Bm595 was the highest in the fifth instar larva and the lowest in egg. The quantity of Bm595 transcription from high to low was testis, silk gland, gut, head, ovary, fat body, epidermis, and air tube, respectively. Western blot results showed that Bm595 was highly expressed in testis, moderately expressed in silk gland and head. Bm595 also existed in fat body. Bm595 was mainly localized in nucleus by immunocytochemistry. 【Conclusion】 A preliminary analysis on Bm595 was made at the mRNA, protein expression and cell level which laid a good foundation for the further studies on Bm595 function.

Key words: Bm595, tissue distribution, subcellular localization

王帅玉,盛清,吕正兵,陈健,聂作明,王丹,刘立丽,沈红丹,舒建洪,陈剑清,吴祥甫,张耀洲
. 家蚕Bm595的表达、组织分布及亚细胞定位[J]. 中国农业科学, 2010, 43(3): 648-654 .

WANG Shuai-yu,SHENG qing,Lü Zheng-bing,CHEN Jian,NIE Zuo-ming,WANG Dan,LIU Li-li,SHEN Hong-dan,SHU Jian-hong,CHEN Jian-qing,WU Xiang-fu,ZHANG Yao-zhou
. Expression, Tissue Distribution and Subcellular Localization of Bm595 from Silkworm (Bombyx mori)
[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2010, 43(3): 648-654 .

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[1]	郭绍雷,许建兰,王晓俊,宿子文,张斌斌,马瑞娟,俞明亮. 桃XTH家族基因鉴定及其在桃果实贮藏过程中的表达特性[J]. 中国农业科学, 2022, 55(23): 4702-4716.
[2]	徐欢欢,李逸,高伟,王永勤,刘乐承. 洋葱γ-谷氨酰转肽酶AcGGT的克隆与鉴定[J]. 中国农业科学, 2021, 54(19): 4169-4178.
[3]	王昊,尹莲,刘洁霞,贾丽丽,丁旭,沈迪,冯凯,徐志胜,熊爱生. 类胡萝卜素裂解双加氧酶基因AgCCD4调控芹菜不同组织的着色[J]. 中国农业科学, 2021, 54(15): 3279-3294.
[4]	孙洪影,王岩,李伟佳,朱天姝,姜颖,许妍,吴清悦,张志宏. 森林草莓FveD27的表达特性和功能[J]. 中国农业科学, 2021, 54(10): 2179-2191.
[5]	原新博,程婷婷,惠小涵,陈章玉,王瑞红,柯卫东,郭宏波. 莲藕多酚氧化酶互作蛋白的筛选及验证[J]. 中国农业科学, 2020, 53(18): 3777-3791.
[6]	刘佼佼,王学敏,马琳,崔苗苗,曹晓宇,赵威. 紫花苜蓿MsWRKY42的分离、鉴定及其对非生物胁迫的响应[J]. 中国农业科学, 2020, 53(17): 3455-3466.
[7]	葛廷,黄雪,谢让金. 柑橘CitPG34的克隆、定位与表达分析[J]. 中国农业科学, 2019, 52(19): 3404-3416.
[8]	蒋梦婷,朱宁,龚洪泳,侯应军,余心怡,渠慎春. ‘南通小方柿’赤霉素不敏感基因DkGAI2的克隆与功能分析[J]. 中国农业科学, 2019, 52(19): 3417-3429.
[9]	张文颖，王晨，朱旭东，马超，王文然，冷翔鹏，郑婷，房经贵. 葡萄全基因组DELLA蛋白基因家族鉴定及其应答外源赤霉素调控葡萄果实发育的特征[J]. 中国农业科学, 2018, 51(16): 3130-3146.
[10]	魏周玲，彭浩然，潘琪，张永至，蒲运丹，吴根土，青玲，孙现超. 核糖体失活蛋白（α-MC）亚细胞定位及对TMV的抑制作用[J]. 中国农业科学, 2017, 50(5): 840-848.
[11]	刘维，刘浩，董双玉，古丰玮，陈志强，王加峰，王慧. 水稻叶鞘原生质体转化体系的构建及Pik-H4和AvrPik-H4蛋白的瞬时表达[J]. 中国农业科学, 2017, 50(23): 4575-4584.
[12]	彭浩然，蒲运丹，张永至，薛杨，武改霞，青玲，孙现超. ToMV外壳蛋白互作IP-L蛋白的亚细胞定位及表达分析[J]. 中国农业科学, 2017, 50(17): 3344-3351.
[13]	贾瑞瑞，周鹏飞，白晓晶，陈善春，许兰珍，彭爱红，雷天刚，姚利晓，陈敏，何永睿，李强. 柑橘响应溃疡病菌转录因子CsBZIP40的克隆及功能分析[J]. 中国农业科学, 2017, 50(13): 2488-2497.
[14]	杨丽群，贾乐梅，唐梅，陈毅彪，崔红娟. 家蚕BmYki-1基因鉴定与表达特征[J]. 中国农业科学, 2016, 49(8): 1607-1616.
[15]	韩立强，王月影，王林枫，朱河水，钟凯，褚贝贝，杨国宇. 奶牛SREBP1蛋白在乳腺上皮细胞的表达定位及对SCD1基因启动子的转录调控[J]. 中国农业科学, 2016, 49(24): 4797-4805.

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