中国农业科学 ›› 2008, Vol. 41 ›› Issue (10): 2909-2915 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.10.001
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共转化获得无抗性标记的转反义蜡质基因籼稻
摘要： 【目的】利用转基因技术将反义蜡质基因导入籼稻成熟胚愈伤组织中，改良籼稻稻米直链淀粉含量。【方法】用根癌农杆菌介导的方法将p13W8质粒（含反义蜡质基因）和pCAMBIA1300质粒（含抗潮霉素抗性基因）对2个籼稻品种的成熟胚愈伤组织进行遗传共转化。【结果】供试材料愈伤组织继代培养18～24 d后具有较高的转化频率和分化频率，可作为共转化的良好受体；抗性愈伤组织PCR检测结果表明，抗潮霉素抗性基因的阳性检测率为97.6%，反义蜡质基因的阳性检测率为27.1%。在46株转基因潮霉素抗性植株中，反义蜡质基因阳性株为5株，占转基因植株的10.9%。经PCR检测，发现上述4个株系T1群体中发生抗潮霉素抗性基因和反义蜡质基因片段的分离，从286个T1单株中筛选到了39个单株只带反义蜡质基因片段，而无潮霉素抗性基因的转基因植株，占T1单株总数的13.6%。部分转反义蜡质基因植株种子的直链淀粉含量有不同程度的降低。【结论】通过农杆菌介导的遗传共转化方法，将反义蜡质基因Waxy导入籼稻成熟胚愈伤组织，获得了直链淀粉含量明显降低的仅含反义蜡质基因籼稻株系。
