中国农业科学 ›› 2000, Vol. 33 ›› Issue (4): 38-45 .

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大麦黄矮病毒GAV株系通读蛋白基因的序列分析及其在大肠杆菌中的表达

常胜军,王锡锋,李莉,马占鸿,周广和   

  1. 中国农业科学院植物保护研究所!植物病虫害生物学国家重点实验室
  • 出版日期:2000-04-20 发布日期:2000-04-20

  1. 中国农业科学院植物保护研究所!植物病虫害生物学国家重点实验室
  • Online:2000-04-20 Published:2000-04-20

摘要: 以大麦黄矮病毒 ( BYDV) GAV株系的 RNA为模板 ,通过 RT- PCR扩增获得通读蛋白 ( readthrough protein RTP)基因的目的片段。将其重组到 p GEM- 7zf( + )并转化 JM1 0 9得到了含有完整 RTP基因的重组子。采用双脱氧终止法进行序列分析。结果表明 ,RTP基因为1 377nt,与文献〔1〕报道的血清学较密切的 BYDV MAV- PS1相比 ,核苷酸和氨基酸的同源性分别为 87.4%和 87.1 %。将此 RTP基因克隆到原核表达质粒 p ET- 5a上 ,在大肠杆菌 BL2 1( DE3)中用 IPTG诱导表达 ,利用分离包含体的方法结合 SDS- PAGE电泳 ,得到了纯化的分子量为 66ku的非融合蛋白

关键词: 大麦黄矮病毒, 通读蛋白基因, 序列, 原核表达