超声波法直接导入外源基因：高效烟草转化系统的建立

doi:10.3864/j.issn.0578-1752.1991-24-02-83-90

中国农业科学 ›› 1991, Vol. 24 ›› Issue (02): 83-90 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.1991-24-02-83-90

超声波法直接导入外源基因：高效烟草转化系统的建立

章力建,陈乐玫,袁静,李长公,贾士荣,许宁,赵南明

中国农业科学院生物技术研究中心清华大学生物科学与技术系

出版日期:1991-03-20 发布日期:1991-03-20

中国农业科学院生物技术研究中心清华大学生物科学与技术系

Published:1991-03-20 Online:1991-03-20

摘要/Abstract

摘要： 报告了一种新的将外源基因导入带壁植物细胞的方法——超声波直接导入外源基因法。将烟草叶片小块置于含pBI121.1质粒的缓冲液中，用声强为0.5w/cm#+2的脉冲超声波处理30分钟，培养一天后86%的叶块中检测到有GUS基因的短暂表达，叶片组织的平均转化面积高达60%-70%。处理叶块中的60%在含Kan 100mg/1的分化培养基上再生出Kan抗性芽，对照叶块则在此培养基上全部死亡。经检测Kan抗性小植株叶片中的GUS活性，按外植体总数计算，稳定转化率达22.3%，抽样检测NPTII活性和DNA斑点杂交均显阳性，证明外源基因已整合到烟草DNA中。

章力建,陈乐玫,袁静,李长公,贾士荣,许宁,赵南明. 超声波法直接导入外源基因：高效烟草转化系统的建立[J]. 中国农业科学, 1991, 24(02): 83-90 .

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