中国农业科学 ›› 2010, Vol. 43 ›› Issue (9): 1954-1962 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.09.024
陈瑞佶,高翔,陈其皎,董剑,赵万春,李艳亮,王明霞,李敏,庞红喜,李哲清,刘俊
Cloning and Prokaryotic Expression of an avenin-like from Wheat Variety Shaan 253
CHEN Rui-ji, GAO Xiang, CHEN Qi-jiao, DONG Jian, ZHAO Wan-chun, LI Yan-liang,WANG Ming-xia, LI Min, PANG Hong-xi, LI Zhe-qing, LIU Jun
摘要:
【目的】克隆小麦品种陕253中的新型avenin-like(类燕麦储藏蛋白),并构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。【方法】利用PCR方法从小麦品种陕253中克隆新型avenin-like,将克隆的avenin-like亚克隆至表达载体,经酶切及测序鉴定后,转化宿主菌 Escherichia coli Rosetta-gami B (DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白,并利用Western blot进行检测。【结果】从小麦品种陕253克隆获得3个新avenin-like,GenBank登录号分别为GQ903577、GQ903578和GQ903579。序列分析表明,其中GQ903579为假基因,利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,实现了对登录号为GQ903578的基因在原核系统的特异性表达。【结论】新型avenin-like的克隆及原核表达的成功,为小麦品质改良提供了研究基础。