用荧光定量RT-PCR方法分析B型和ZHJ-1型烟粉虱热休克基因hsp70和hsp90的表达

doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.025

中国农业科学 ›› 2008, Vol. 41 ›› Issue (11): 3636-3644 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.025

用荧光定量RT-PCR方法分析B型和ZHJ-1型烟粉虱热休克基因hsp70和hsp90的表达

王海鸿,雷仲仁

中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

收稿日期:2007-12-04 修回日期:2008-02-22 出版日期:2008-11-10 发布日期:2008-11-10
通讯作者: 雷仲仁

中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

Received:2007-12-04 Revised:2008-02-22 Online:2008-11-10 Published:2008-11-10

摘要/Abstract

摘要：

【目的】比较温度胁迫对两种生物型烟粉虱体内hsps诱导表达的差异。【方法】根据烟粉虱hsp70基因、hsp90基因和18S rRNA序列，设计并合成引物用于实时定量RT-PCR，扩增产物连接到质粒pMD18-T载体上，重组质粒经筛选、签定和10×梯度稀释后作为模板，用于标准曲线的制作和样品检测，检测温度胁迫对B型和ZHJ-1型烟粉虱hsp70和hsp90 mRNA转录水平的诱导情况。【结果】在受到34℃、37℃、40℃和43℃的高温胁迫时，两者hsps的诱导水平无显著差异(P＞0.05)；在受到4℃、7℃、10℃和13℃的低温胁迫时，B型烟粉虱体内hsps的诱导表达水平显著超过了ZHJ-1型烟粉虱(P＜0.05)。【结论】经检验所建立的荧光定量RT-PCR体系特异性好，灵敏度高，符合检测烟粉虱hsps mRNA转录水平的要求。低温胁迫下B型烟粉虱体内hsps的高表达可能是其较强的耐受低温能力的主要机制之一。

关键词: 烟粉虱, 热休克基因, SYBR Green I, 荧光定量RT-PCR, 温度胁迫

王海鸿,雷仲仁. 用荧光定量RT-PCR方法分析B型和ZHJ-1型烟粉虱热休克基因hsp70和hsp90的表达[J]. 中国农业科学, 2008, 41(11): 3636-3644 .

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