中国农业科学 ›› 2004, Vol. 37 ›› Issue (01): 148-148 .

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猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立

@刘建杰$华中农业大学动物医学院动物病毒   

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  • 出版日期:2004-01-20 发布日期:2004-01-20

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  • Online:2004-01-20 Published:2004-01-20

摘要: 根据胸膜肺炎放线杆菌S4 0 74菌株毒素I的序列 ,设计了 1对引物 ,从本室自己分离的菌株中扩增了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I的结构基因 (apxICA) ,扩增的DNA片段大小为 36 4 0bp(4 6 87~ 832 6bp) ,将其克隆到pMD18 T载体中 ,酶切鉴定和序列测定后 ,进一步将其插入pET 2 8a中构建了原核表达载体 ,SDS PAGE和Westernblotting分析表明 ,该基因在大肠杆菌BL2 1(DE3 )中获得了表达 ,而且表达的蛋白质具有免疫学活性。利用表达的蛋白作为

关键词: 猪胸膜肺炎放线杆菌, apxICA基因, 克隆, 原核表达, ELISA

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