中国农业科学 ›› 2002, Vol. 35 ›› Issue (4): 394-398 .

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双价抗虫基因共转化烟草叶绿体的研究

苏宁,杨波,孟昆,李佚女,孙萌,孙丙耀,沈桂芳   

  1. 中国农业科学院生物技术研究所
  • 出版日期:2002-04-20 发布日期:2002-04-20

  1. 中国农业科学院生物技术研究所
  • Online:2002-04-20 Published:2002-04-20

摘要: 分别构建苏云金芽孢杆菌晶体毒蛋白基因 [BtCryIA(C) ]和水稻巯基蛋白酶基因 (Oryzacystatin ,OC)叶绿体转化载体 ,其中Bt基因叶绿体转化载体以烟草叶绿体基因trnH psbA trnK为同源片段 ,以水稻 (OryzasativaL .)叶绿体 psbA基因启动子和终止子为调控基因 ;OC基因叶绿体表达载体以烟草叶绿体基因片段 psbA ORF5 12为同源片段 ,以烟草叶绿体 16S启动子和终止子为调控基因 ;两载体均以壮观霉素抗性基因 (aadA)为筛选基因。利用基因枪方法 ,共转化烟草叶片 ,获得壮观霉素抗性植株。经Southern、Western检测、表达蛋白活性测定证明 ,双价抗虫基因己整合到烟草叶绿体中并得到表达。转基因植株抗棉铃虫试验表明 ,转基因植株具有显著杀虫活性

关键词: OC基因, Bt基因, 叶绿体转化, 抗虫作用

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