中国农业科学 ›› 1995, Vol. 28 ›› Issue (03): 58-67 .

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猪卵巢卵母细胞体外成熟与体外受精的研究

秦鹏春,谭景和,吴光明,王林安,杨庆章,冯怀亮,郝艳红,张秋明,徐立滨   

  1. 东北农业大学生物工程系,哈尔滨 150030 华南师范大学 东北农业大学动物医学系 中国人民解放军农牧大学
  • 出版日期:1995-05-20 发布日期:1995-05-20

  1. 东北农业大学生物工程系,哈尔滨 150030 华南师范大学 东北农业大学动物医学系 中国人民解放军农牧大学
  • Online:1995-05-20 Published:1995-05-20

摘要: 自屠宰场取猪卵巢825个,得卵母细胞8346个,将其分为3类。分类后卵母细胞在含有pFF或PMSG的TCM-199培养液中于5%CO#-2、95%空气、饱和湿度、39℃下培养36小时。成熟卵母细胞用前培养法加肝素或咖啡因获能的鲜精,以2×10#+5/ml的精子密度体外受精。在授精12-17小时以后,一些受精卵以手术法移至受体母猪输卵管中,另一些则更换BMOC-2培养液继续体外培养。3类卵母细胞间的成熟率与卵裂率有明显的差异。成熟培养液中加入PMSG和pFF,可明显提高卵母细胞成熟率(67.7%:17.8%)和桑椹胚率(6.5%∶2.8%)用笔者的培养液,有些胚胎成功地越过4细胞阻断而获得了猪的纯体外培养桑椹胚(1990.5)。移入受精卵的9头母猪,有3头妊娠,其中1头于1990年9月产5头仔猪。离子测定结果显示不同离子(Na、Ca、Cl、K)在精子某些部分、卵母细胞和受精卵的表面分布有明显改变。RMP检测指出培养前A类和部分B类卵母细胞为负值,C类和剩余部分B类为正值。培养后不同时间3类卵母细胞RMP差异明显,说明其代谢水平强弱不一。受精后皆为负值,说明物质代谢比受精前更为活跃。

关键词: 猪, 体外受精, 离子分布, RMP