摘要： 【目的】对H9N2亚型猪流感病毒NS1（nonstructural protein 1）基因进行原核表达，获得纯化表达产物，以期为检测猪流感抗体的 ELISA试剂盒的研制奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增了猪流感病毒（H9N2）的NS1基因，将其克隆于表达载体pET-28a（+）上构建成重组质粒pET-NS1，转化受体菌E.coli BL21-DE3感受态细胞，经酶切鉴定及序列分析，筛选出正确重组质粒转化子。【结果】经终浓度5 mmol•L-1乳糖诱导，SDS－PAGE电泳结果显示，重组蛋白NS1得到大量表达，分子质量约为26kD。经Western-blotting分析，表达蛋白能与阳性血清发生特异性反应，而与阴性血清不反应；ELISA检测显示，在被检血清稀释1 280倍时，阳性血清的OD650值大约是阴性血清的3倍，差异明显。【结论】重组蛋白NS1表达量高，易于纯化并且具有良好的血清学反应的特异性。
