中国农业科学 ›› 1999, Vol. 32 ›› Issue (05): 49-54 .

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大麦黄矮病毒缺失复制酶基因植物表达载体的构建及转基因小麦的获得

田苗英,吴茂森,陈彩层,肖红,成卓敏   

  1. 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100094
  • 出版日期:1999-09-20 发布日期:1999-09-20

  1. 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100094
  • Online:1999-09-20 Published:1999-09-20

摘要: 以大麦黄矮病毒GPV株系的RNA为模板,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,扩增出1134bp的缺失复制酶基因。将扩增的片段克隆到pUC19的SmaI位点上并进行了序列测定,获得正向插入的重组质粒pUC19D。以KpnI和XbaI从pUC19D上切下此基因并插入质粒pEmu-mcs-N得到植物表达载体pPPI8。应用花粉管通道法转化普通小麦品种陇鉴127、陕160和晋麦47,通过卡那霉素抗性筛选、PCR和PCR-Southern检测,3个品种均获得了转基因小麦植株。

关键词: 大麦黄矮病毒, 缺失复制酶基因, 花粉管通道法, 转基因小麦

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