中国农业科学 ›› 1998, Vol. 31 ›› Issue (03): 13-18 .

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苏云金芽孢杆菌cry基因PCR-RFLP鉴定体系的建立

宋福平,张杰,黄大昉,谢天健,杨自文,戴莲韵,李国勋   

  1. 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100094 中国农业科学院生物技术研究中心 湖北省农业科学院Bt研究开发中心 中国林业科学院森林保护研究所 东北农业大学昆虫科学系
  • 出版日期:1998-05-20 发布日期:1998-05-20

  1. 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100094 中国农业科学院生物技术研究中心 湖北省农业科学院Bt研究开发中心 中国林业科学院森林保护研究所 东北农业大学昆虫科学系
  • Online:1998-05-20 Published:1998-05-20

摘要: 根据苏云金芽孢杆菌(Bt)cry2、cry3、cry4/cry10型基因的保守区分别设计了3对通用引物S5un2/S3un2、S5un3/S3un3和S5un4/S3un4。PCR扩增产生约1.2kb、1.4kb和1.5kb的产物,然后分别用HincⅡ/MspⅠ、Bg1Ⅱ/PstⅠ和BstEⅡ/DraⅠ酶切,并经RFLP分析鉴定Bt菌株的cry基因型。利用该方法对含已知cry2、cry3、和cry4/cry10型基因的Bt菌株和遗传工程菌进行基因分析,得到的结果与预测的RFLP相符,证明该方法可行。在此基础上对14株Bt分离株的基因型进行了鉴定,其中有9株分离株含cry2型基因;仅菌株Bt22含cry3型基因;所有被测菌株均不含cry4/cry10型基因。

关键词: PCR-RFLP, 苏云金芽孢杆菌, cry基因

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