中国农业科学 ›› 2008, Vol. ›› Issue (12): 4230-4237 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.12.038

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表达猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原的重组活载体疫苗株的构建

丁军涛,陈晓宇,骆学农,王 颖,张少华,刘 斌,郑亚东,景志忠,才学鹏

  

  1. 中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室
  • 收稿日期:2007-11-21 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-12-20 发布日期:2008-12-20
  • 通讯作者: 才学鹏

  1. 中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室
  • Received:2007-11-21 Revised:1900-01-01 Online:2008-12-20 Published:2008-12-20

摘要:

【目的】构建表达猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原的重组鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株。【方法】克隆并改造TSOL18基因,构建重组质粒pYA3341-TSOL18,电转入鼠伤寒沙门氏菌终宿主菌株X4550,体外鉴定重组菌X4550(pYA3341-TSOL18)表达蛋白的免疫原性、稳定性、生长曲线、安全性和小鼠免疫试验进行评价。【结果】酶切鉴定和基因序列测定证实重组质粒构建成功;尿素-SDS-PAGE检测有目的蛋白条带,Western Blot证实该抗原具有免疫原性;重组菌株在体外营养选择压力下可稳定地携带重组质粒传代繁殖;蛋白的表达对重组菌株的生长基本没有影响;小鼠实验证实重组菌安全可靠,二免后ELISA检测产生抗体。【结论】成功构建了能稳定表达 TSOL18蛋白的可口服减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株X4550(pYA3341-TSOL18)。

关键词: 猪带绦虫六钩蚴, TSOL18, 减毒鼠伤寒沙门氏菌, 活载体疫苗