中国农业科学 ›› 2008, Vol. 41 ›› Issue (8): 2448-2453 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.08.033

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布鲁氏菌S2 WboA基因缺失株的构建及免疫效果

  

  1. 中国兽医药品监察所
  • 收稿日期:2007-05-14 修回日期:2008-03-26 出版日期:2008-08-10 发布日期:2008-08-10

  

  1. 中国兽医药品监察所
  • Received:2007-05-14 Revised:2008-03-26 Online:2008-08-10 Published:2008-08-10

摘要: 【目的】WboA基因编码光滑型布鲁氏菌脂多糖(LPS)O-侧链合成必须的糖基转移酶,该基因的缺失或破坏会影响布鲁氏菌光滑型表型的形成。本研究拟构建WboA基因缺失的重组粗糙型布鲁氏菌,以使布鲁氏菌弱毒疫苗与野毒株布鲁氏菌感染相区分。【方法】以猪源光滑型布鲁氏菌S2株为研究对象,通过同源重组将氯霉素抗性基因(Cmr)完全替代S2株的WboA基因,获得重组粗糙型布鲁氏菌rS2-WboA株。【结果】rS2-WboA株在适宜的培养基(TSA)上传50代后仍保持对氯霉素的抗性。用1×107 CFU rS2-WboA免疫Balb/c小鼠和豚鼠,1个月后均能通过平板凝集试验检测到粗糙型抗体。1×1011 CFU rS2-WboA菌攻毒Balb/c小鼠后,不会引起死亡,并且能抵抗200 CFU强毒M28的攻击。小鼠试验显示了rS2-WboA与原始株S2相似的保护性和更高的安全性,其保护性也略高于另一重组株rS2-WbkC。【结论】WboA可作为构建重组粗糙型布鲁氏菌疫苗株缺失的靶基因。

关键词: 布鲁氏菌, WboA基因, 免疫性