环介导等温扩增技术检测菊花中番茄不孕病毒

doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.024

中国农业科学 ›› 2010, Vol. 43 ›› Issue (6): 1288-1294 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.024

环介导等温扩增技术检测菊花中番茄不孕病毒

刘佳,黄丛林,吴忠义,张秀海,王永勤

（北京市农林科学院/北京农业生物技术研究中心）

收稿日期:2009-08-13 修回日期:2009-10-09 出版日期:2010-03-15 发布日期:2010-03-15
通讯作者: 王永勤

Detection of Tomato Aspermy Virus Infecting Chrysanthemums by LAMP #br#

LIU Jia, HUANG Cong-lin, WU Zhong-yi, ZHANG Xiu-hai, WANG Yong-qin #br#

（北京市农林科学院/北京农业生物技术研究中心）

Received:2009-08-13 Revised:2009-10-09 Online:2010-03-15 Published:2010-03-15
Contact: WANG Yong-qin

摘要/Abstract

摘要： 摘要:[目的] 环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术。本研究拟用该新型技术建立菊花番茄不孕病毒的检测方法。[方法]针对靶基因的6 个区域设计4 种特异引物，对LAMP反应的MgCl2、dNTPs、甜菜碱、内引物、外引物各个成分进行了优化；建立利用LAMP技术快速检测菊花番茄不孕病毒的技术体系；比较LAMP和RT-PCR两种不同方法的灵敏度，并用该方法检测。 [结果] 建立了菊花番茄不孕病毒LAMP的检测方法；LAMP与RT-PCR相比具有灵敏度高、快速、简便等优点。 [结论] LAMP是在等温条件下进行，具有时间少，成本低，特异性高，检测方法多等优点；适于生产上推广使用。

关键词: 菊花')">菊花, 番茄不孕病毒, 反转录聚合酶链式反应, 环介导等温核酸扩增技术, 检测

Abstract:

【Objective】 In this study, the LAMP (loop-mediated isothermal amplification) was used to detect TAV (Tomato aspermy virus). 【Method】 Using TAV CP cDNA clones as templates, the reaction conditions (such as Mg2+, dNTPs, betaine and primers concentrations) optimized and the sensitivities of LAMP and RT-PCR were compared in detecting TAV. 【Result】 The LAMP method was developed in this experiment and it was more sensitive than RT-PCR method for detecting TAV. 【Conclusion】 The LAMP as a simple and quick method can accurately detect TAV in chrysanthemum samples.

Key words: chrysanthemum')">chrysanthemum, Tomato aspermy virus, RT-PCR, loop-mediated isothermal amplification (LAMP) , detection

刘佳,黄丛林,吴忠义,张秀海,王永勤 . 环介导等温扩增技术检测菊花中番茄不孕病毒[J]. 中国农业科学, 2010, 43(6): 1288-1294 .

LIU Jia,HUANG Cong-lin,WU Zhong-yi,ZHANG Xiu-hai,WANG Yong-qin
. Detection of Tomato Aspermy Virus Infecting Chrysanthemums by LAMP #br# [J]. Scientia Agricultura Sinica, 2010, 43(6): 1288-1294 .

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