中国农业科学 ›› 1999, Vol. 32 ›› Issue (01): 58-62 .

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植物monellin甜蛋白基因的细菌化改造合成及其在大肠杆菌中的表达

崔洪志,李敏,徐琼芳,郭三堆   

  1. 中国农业科学院生物技术研究中心,北京100081 中国农业科学院作物育种栽培研究所
  • 出版日期:1999-01-20 发布日期:1999-01-20

  1. 中国农业科学院生物技术研究中心,北京100081 中国农业科学院作物育种栽培研究所
  • Online:1999-01-20 Published:1999-01-20

摘要: 根据西非植物Dioscoreophyllum cumminisii果实中分离到的monellin甜蛋白的氨基酸序列,首次按照细菌优化密码子,人工合成了全长294bp的monellin甜蛋白基因。克隆后序列分析表明,所获得基因与设计相符。构建了该基因的表达载体pGESP9。经42℃诱导表达,发现所合成甜蛋白基因可在大肠杆菌BL21中高效表达,表达量占菌体可溶性蛋白的22.8%。分离纯化monellin,经测定其甜度是相同重量蔗糖的1100倍,且甜味纯正持久。

关键词: 甜蛋白, 细菌优化密码子, 基因合成, 诱导表达, 相对甜度

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