中国农业科学 ›› 2008, Vol. 41 ›› Issue (11): 3651-3655 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.027

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丁草胺荧光偏振免疫分析——示踪物的合成与鉴定

薛 钢,雷红涛,沈玉栋,刘细霞,吴 青,孙远明,王 弘

  

  1. 华南农业大学食品质量安全研究所/广东省食品质量安全重点实验室
  • 收稿日期:2007-11-05 修回日期:2007-11-22 出版日期:2008-11-10 发布日期:2008-11-10
  • 通讯作者: 雷红涛

  1. 华南农业大学食品质量安全研究所/广东省食品质量安全重点实验室
  • Received:2007-11-05 Revised:2007-11-22 Online:2008-11-10 Published:2008-11-10

摘要:

【目的】为建立除草剂丁草胺的荧光偏振免疫检测方法,对关键试剂示踪物进行合成与鉴定。【方法】以异硫氰酸荧光素、乙二胺和己二胺为原料,合成了异硫氰酸荧光素乙二胺(EDF)和异硫氰酸荧光素己二胺(HDF)两种中间体,薄层层析法分离出目标产物,电喷雾电离质谱法鉴定;然后将5-氨基荧光素(AF)、EDF、HDF分别与丁草胺半抗原(BMPA)连接,得到3种不同间隔臂的示踪物(BMPA-AF,BMPA-EDF和BMPA-HDF),利用抗血清稀释曲线测定抗血清效价,竞争抑制曲线测定不同示踪物检测灵敏度。【结果】3种示踪物合成成功,抗血清稀释曲线和竞争抑制曲线显示3种示踪物的抗血清效价分别为1/600、1/1500和1/600,半抑制浓度分别为1 292、433和298 ng•ml-1。【结论】合成出3种不同间隔臂的丁草胺示踪物,对示踪物的性质进行初步研究,为下一步建立丁草胺荧光偏振免疫分析方法奠定了基础。

关键词: 丁草胺, 荧光偏振免疫分析, 示踪物, 异硫氰酸荧光素

Abstract:

Key words: butachlor, fluorescence polarization immunoassay, tracer, fluoresceinthiocarbamyl