大豆株高是由主效或微效基因控制的重要农艺性状。在已报道的株高QTL中,绝大部分定位区间较大,限制了大豆株高分子调控机制的解析。增加遗传图谱的标记密度会显著地提高QTL定位的效率和准确性。本研究利用双亲中黄13和中品03-5373及其衍生的241个重组自交系(RILs)全基因组重测序数据,构建一个包含4011个重组bin标记、总遗传距离为3139.15 cM的高密度遗传图谱,相邻bin标记间的平均距离为0.78 cM。比较基因组分析表明,所构建的遗传图谱与大豆参考基因组具有较高的共线性。基于此图谱,在6个环境中共检测到9个株高QTL,包括3个新位点(qPH-b_11,qPH-b_17和qPH-b_18)。其中,两个环境稳定主效QTL qPH-b_13和qPH-b_19-1可解释10.56%~32.7%的表型变异。qPH-b_13和qPH-b_19-1被精细定位到440.12 kb和237.06 kb的基因组区间,分别包含54和28个注释基因。进一步的拟南芥同源基因功能和候选基因表达分析表明,基因Glyma.13G292600和Glyma.19G194100分别为qPH-b_13和qPH-b_19-1的候选功能基因。