【目的】马铃薯纺锤形块茎类病毒属的多种类病毒可侵染番茄,造成严重病害,威胁产业发展。研发番茄类病毒检测技术可为病害防控提供技术支撑。此外,虽然国外有报道说我国出口的番茄种子上携带类病毒,但仍未有定论,尚需确认,并且有必要弄清楚我国番茄上类病毒的发生情况。【方法】 使用序列比对的方法,比较能够侵染番茄的不同类病毒的基因组序列,找到保守序列,以此为模板,通过体外转录的方法制备RNA探针。通过斑点杂交的方法,测试该探针的检测灵敏度和特异性。另外,利用该通用探针,使用斑点杂交的方法,普查我国番茄上的类病毒发生情况。【结果】能够侵染番茄的6种类病毒:金鱼花潜隐类病毒(CLVd)、辣椒小果类病毒(PCFVd)、马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)、番茄顶缩类病毒(TASVd)、番茄褪绿矮缩类病毒(TCDVd)和番茄雄性株类病毒(TPMVd)的基因组序列含有一段长度为61 bp的保守序列。利用该序列制备的RNA探针能够同时检测这6种类病毒,其杂交检测的适宜反应温度为55℃~60℃。虽然该探针的检测灵敏度略低于每种类病毒的特异性探针,但可以满足田间大量样品的快速检测的需求。利用该探针,从我国番茄温室栽培的番茄植株上检测到了PSTVd,这是PSTVd在我国番茄上的首次报道。基因组序列比较分析发现,我国PSTVd番茄分离物的序列与国外茄科作物上PSTVd的序列最为接近,并且感染PSTVd的番茄的种子是从国外进口的。这表明我国番茄上的PSTVd应该是通过进口的番茄种子从国外传入的。【结论】研发出了一种能够同时检测侵染番茄的6种类病毒的通用探针,该探针具有快速灵敏的特点,适用于大量样品的快速检测,为番茄类病毒的监测及防控提供了技术支撑;此外,证实我国温室栽培的番茄上的确有PSTVd的发生,应该是通过种子由国外传入的,因此,需要加强进口种子及繁殖材料的检验和检疫,也要加强田间种植番茄的监测。