Journal of Integrative Agriculture ›› 2026, Vol. 25 ›› Issue (1): 394-397.DOI: 10.1016/j.jia.2025.08.001

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猪德尔塔冠状病毒抗原即时检测：胶体金与荧光免疫层析试纸条

  

  • 收稿日期:2025-03-06 修回日期:2025-08-05 接受日期:2025-07-12 出版日期:2026-01-20 发布日期:2025-12-09

Point-of-care antigen detection for porcine deltacoronavirus: Colloidal gold and fluorescent immunochromatographic test strips

Zezhao Cao1*, Junchao Shi1*, Ruijie Hu1, Jun Xue1, Gaili Wang2, Zi Li1, Huabo Yu1, Wei Liu1, Wenqi He1, Hualei Wang1, Haili Zhang1#, Yungang Lan1#   

  1. 1 State Key Laboratory for Diagnosis and Treatment of Severe Zoonotic Infectious Diseases/Key Laboratory for Zoonosis Research of the Ministry of Education, Institute of Zoonosis, College of Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China

    2 Jilin Academy of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Changchun 130062, China

  • Received:2025-03-06 Revised:2025-08-05 Accepted:2025-07-12 Online:2026-01-20 Published:2025-12-09
  • About author:Zezhao Cao, E-mail: 599142457@qq.com; Junchao Shi, E-mail: sjc@jlu.edu.cn; #Correspondence Haili Zhang, E-mail: zhanghaili@jlu.edu.cn; Yungang Lan, lanyungang@jlu.edu.cn * These authors contributed equally to this work.
  • Supported by:

    This work was financially supported by the National Key Research and Development Program of China (2021YFF0703600).

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摘要：

猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）感染可引起仔猪严重腹泻、脱水甚至死亡，威胁养猪业发展，且PDCoV具备跨种传播的潜能，存在不容忽视的人兽共患病风险。因此，开发PDCoV现场快速检测工具对其防控至关重要。本研究针对 PDCoV 高度保守的核衣壳（N）蛋白，建立了胶体金和荧光微球两种免疫层析试纸条。首先，原核表达系统表达并纯化获得N蛋白，免疫小鼠后采用杂交瘤技术筛选出 4 株高亲和力单克隆抗体。经配对优化，选择最优组合制备胶体金与荧光微球标记试纸，均可在 5 分钟内完成检测。胶体金试纸条对病毒感染细胞培养物的检测下限为 102.3 TCID50/0.1 mL，荧光试纸条灵敏度更高，达101.7 TCID50/0.1 mL。两种试纸条均高度特异，与猪血凝性脑脊髓炎病毒（PHEV）、伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒 2 型（PCV2）、猪圆环病毒 3 型（PCV3）、塞内卡病毒（SVA）及牛疱疹病毒4型（BoHV-4）等均无交叉反应。两种试纸条在室温下可稳定保存 6 个月，有较好的稳定性。临床测试腹泻仔猪样本显示：胶体金试纸条与 qRT-PCR 的符合率为 90.32%（28/31），荧光试纸条与 qRT-PCR 的符合率为 96.77%（30/31）。结果表明，本研究建立的两种试纸条操作简便、快速，无需专业设备，肉眼或便携紫外灯即可判读结果，具有良好的临床应用潜力，为 PDCoV 现场筛查、疫情溯源及跨物种传播监测提供了重要技术支持。