中国农业科学 ›› 2010, Vol. 43 ›› Issue (4): 873-880 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.04.028
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潘敏慧,许湲,余泉友,刘佳,刘迪,赵丹红,鲁成
PAN Min-hui, XU Yuan, YU Quan-you, LIU Jia, LIU Di, ZHAO Dan-hong, LU Cheng
摘要:
【目的】谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathiones S-tansferases,GSTs)是一类由多基因编码的多功能同工酶超家族,在解毒内源和外源性有毒物质中起着重要作用,家蚕GSTs的研究,可为解析家蚕解毒机制奠定基础。【方法】利用生物信息学和分子生物学方法克隆和分析家蚕GSTe3(BmGSTe3),利用RT-PCR分析该基因在家蚕体内的表达情况,利用重组杆状病毒真核表达系统在sf9细胞中真核表达BmGSTe3。【结果】在家蚕中克隆了家蚕的GSTe3,该基因由5个外显子与4个内含子组成,外显子总长度为512 bp,属于昆虫特异的Epsilon家族。BmGSTe3包含N-末端和C-末端2个结构域,N-末端由b-a-b-a-b-b-a共7个结构基序组成,而C-末端则由5个?螺旋构成,在启动子上游2 500 bp区域内共发现了15个可能的转录调控元件。BmGSTe3的表达具有较高的组织特异性,它只在家蚕血液和头部表达。BmGSTe3在sf9细胞中表达的BmGSTe3蛋白具有较好的GSTs酶活性。【结论】BmGSTe3属于昆虫特异的Epsilon家族,其蛋白具有较好的GSTs酶活性。