家蚕,线粒体,细胞色素C,细胞凋亡," /> 家蚕,线粒体,细胞色素C,细胞凋亡,"/> Bombyx mori,mitochondrial,cytochrome c,apoptosis,"/>
中国农业科学 ›› 2009, Vol. 42 ›› Issue (7): 2546-2551 .doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.07.036
潘敏慧,陈 默,黄淑静,于子舒,成传刚,鲁 成
PAN Min-hui, CHEN Mo, HUANG Shu-jing, YU Zi-shu, CHENG Chuan-gang, LU Cheng#br#
摘要:
【目的】细胞色素C是线粒体凋亡路径上的关键因子,通过家蚕细胞色素C基因的克隆和其蛋白在家蚕凋亡细胞中的释放研究,为家蚕细胞凋亡的研究奠定基础。【方法】利用生物信息学和分子生物学方法克隆家蚕细胞色素C基因,通过紫外线照射诱导家蚕细胞凋亡,应用流式细胞仪和Western-blotting检测家蚕凋亡细胞的线粒体膜电位变化和细胞色素C的释放。【结果】在家蚕中克隆了一个含有细胞色素C保守结构域的同源基因,该基因cDNA长570 bp,有3个外显子,开放阅读框(open reading frame,ORF)长324 bp,编码108个氨基酸,存在参与细胞凋亡时与下游凋亡蛋白酶激活因子(Apaf-1)相互作用的保守关键位点;紫外线诱导家蚕胚胎细胞BmE-SWU1凋亡后12 h,细胞线粒体跨膜电位明显下降,同时检测到了细胞色素C由线粒体向细胞质释放。【结论】在家蚕细胞凋亡中可能存在细胞色素C由线粒体释放的路径。