当期目录

2011年 第44卷 第21期 刊出日期：2011-11-01

  

作物遗传育种·种质资源·分子遗传学

一个水稻短根毛突变体的鉴定和基因定位

丁沃娜, 童艳丽, 吴晶, 朱世华

中国农业科学. 2011, 44(21):  4333-4339.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.001

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【目的】鉴定和克隆水稻根毛突变体新基因，了解水稻根毛发育的分子遗传机理。【方法】通过T-DNA插入获得短根毛突变体。采用溶液培养、形态特征观察、杂交后代的表型分离统计及基于图位克隆技术的基因定位等方法，对突变体Ossrh1的表型、遗传和基因精细定位开展研究。【结果】突变体在苗期表现为根毛长度变短，只有野生型长度的36%左右，遗传分析表明该突变性状受1对隐性基因控制，利用Ossrh1和籼稻品种Kasalath杂交构建的F2群体对OsSRH1进行基因定位, 发现与第6染色体上的SSR（simple sequence repeat）标记RM3183和RM193连锁，OsSRH1距它们的遗传距离分别为0.9 cM和1.0 cM。通过在两标记间发展3个新的STS（sequence-tagged site）标记，将OsSRH1精细定位于标记T1757和T1768之间，物理距离约为115 kb。【结论】水稻短根毛突变体Ossrh1的性状由1对隐性核基因控制，该基因位于第6染色体的STS标记T1757和T1768之间115 kb范围内。

生菜低温胁迫转录因子LsICE1的克隆、特征分析及其转化水稻

向殿军, 殷奎德, 满丽莉, 徐正进

中国农业科学. 2011, 44(21):  4340-4349.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.002

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【目的】克隆生菜（Lactuca sativa L.）低温胁迫转录因子LsICE1，对其进行序列分析和水稻遗传转化，研究超表达LsICE1基因对水稻耐低温能力的影响。【方法】设计简并引物，利用RT-PCR技术获得生菜LsICE1基因保守区域，再通过SON-PCR技术获得LsICE1基因的5′端和3′端，拼接得到全长的cDNA。对该序列进行生物信息学分析，采用半定量RT-PCR研究LsICE1的低温表达模式。最后构建植物表达载体，利用农杆菌介导法对水稻进行遗传转化。通过比较低温处理后对照和转基因株系的存活率和生理指标，鉴定超表达LsICE1基因对水稻耐低温能力的调控作用。【结果】测序结果显示，拼接后的cDNA片段长1 622 bp，包含一个1 497 bp完整的开放阅读框，编码498个氨基酸残基，命名为LsICE1，GenBank登录号为HQ848932。半定量RT-PCR研究表明，LsICE1基因是冷诱导条件下差异表达的基因。进化树分析表明，LsICE1蛋白与葡萄的ICE1蛋白亲缘关系最近，处于同一进化分枝。PCR和RT-PCR分子检测证明，LsICE1基因已经整合到水稻基因组中。与对照相比，低温处理后超表达LsICE1基因的转基因株系存活率和脯氨酸含量明显增加，相对电导率和丙二醛含量积累速率明显下降。【结论】首次从生菜中克隆了低温胁迫转录因子LsICE1，超表达LsICE1基因水稻株系提高了抗低温胁迫能力。

高分子量麦谷蛋白亚基基因1Bx14转化小麦

刘香利, 金伟波, 刘缙, 赵惠贤, 郭蔼光

中国农业科学. 2011, 44(21):  4350-4357.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.003

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【目的】利用基因枪将优质高分子量麦谷蛋白亚基基因1Bx14导入普通小麦栽培品种绵阳19，为利用优质基因进行小麦品质改良奠定基础。【方法】构建小麦优质高分子量麦谷蛋白亚基基因1Bx14的胚乳特异性植物表达载体，利用基因枪将其转入不含该亚基的小麦品种绵阳19幼胚愈伤组织中，经潮霉素抗性筛选、PCR检测后，阳性植株进行PCR-Southern和Southern杂交验证，利用SDS-PAGE分析目的基因在转基因后代籽粒中的表达。【结果】从转化的652块愈伤组织中共获得6株转基因阳性植株，转化效率0.92% 。转化后代种子分析表明，1Bx14在部分转基因后代种子中表达，但同时也导致部分内源高分子量麦谷蛋白亚基基因不同程度的沉默。【结论】本研究成功地将小麦高分子量麦谷蛋白亚基基因1Bx14导入普通小麦绵阳19中，并在部分后代种子中得到了表达。

耕作栽培·生理生化·农业信息技术

影响粳稻品种吸氮能力的根系性状

于小凤, 李进前, 田昊, 彭斌, 张燕, 王熠, 袁秋梅, 黄建晔, 王余龙, 董桂春

中国农业科学. 2011, 44(21):  4358-4366.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.004

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【目的】研究不同吸氮量类型粳稻品种根系性状的演变趋势与差异，明确吸氮量大的粳稻品种根系性状的特征，为粳稻品种根系性状的遗传改良提供参考依据。【方法】2008—2009年，在群体水培条件下，以国内、外不同年代育成的94个常规粳稻品种为供试材料，测定根系形态、根系活性、植株各器官干物重和含氮量、产量构成因素等，采用组内最小平方和的动态聚类方法将供试品种按吸氮量的大小从低到高依次分为A、B、C、D、E、F 等6类，研究各类品种根系等性状的差异，分析影响氮素高效吸收的主要根系性状。【结果】供试品种间吸氮量的差异很大，吸氮量最大品种为最小品种的2.94倍（2008年）和2.59倍（2009年）；吸氮量大的品种平均产量极显著高于吸氮量小的品种；生育期、吸氮强度均是影响吸氮量的重要因素，吸氮强度对吸氮量的影响大于生育期对吸氮量的影响；不同吸氮量类型粳稻品种间单株根干重、单株不定根总长、单株总吸收面积、单株活跃吸收面积差异显著，单株根数、单株根系活力的差异因年而异。吸氮量大的品种单株不定根数、单株根干重、单株不定根总长、单株根系总吸收面积、单株根系活跃吸收面积优于吸氮量小的品种；改良根干重、冠根比、单株不定根总长、单条不定根重等性状能显著提高水稻的吸氮量。【结论】供试粳稻品种间吸氮量的差异很大。吸氮强度大是粳稻品种吸氮量大的重要因素。吸氮量大的品种单株根数、单株根干重、单株不定根总长、单株总吸收面积、单株活跃吸收面积、单株根系活力优于吸氮量小的品种，根干重、冠根比、单株不定根总长、单条不定根重是影响粳稻品种吸氮能力的主要根系性状。

超高产春玉米冠层结构及其生理特性

张玉芹, 杨恒山, 高聚林, 张瑞富, 王志刚, 徐寿军, 范秀艳, 杨升辉

中国农业科学. 2011, 44(21):  4367-4376.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.005

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【目的】研究超高产春玉米群体冠层结构和功能特性，揭示超高产形成的生理机制，为春玉米超高产栽培提供理论依据。【方法】以金山27为供试品种，设超高产栽培（SHY）和普通高产栽培（CK）2个处理，于2009年和2010年连续2年的田间试验，测定超高产春玉米冠层结构及生理指标的变化规律。【结果】与普通高产栽培相比，超高产栽培春玉米叶面积指数大，在生育期上表现为吐丝之后更为明显，在叶位上表现为棒三叶最为突出；不同叶位的叶倾角超高产栽培均小于普通高产栽培，而叶向值均大于普通高产栽培，在棒三叶表现最为明显；随着生育时期的推移，超高产栽培与普通高产栽培光合势的差幅增大；吐丝期和乳熟期，两种栽培模式间净光合速率的差异不显著，但冠层光合能力的差异均达到极显著水平；吐丝后40 d内，超高产春玉米叶片SOD和POD酶活性总体上高于普通高产栽培，而MDA含量低于普通高产栽培。【结论】超高产栽培春玉米叶面积指数高，群体光合势大；叶倾角小、叶向值大，冠层结构合理；叶片SOD 和POD活性强，MDA含量低，衰老缓慢，净光合速率相对较高，冠层光合能力强。在合理的栽培技术调控下，超高产春玉米群体结构与个体功能实现了协同增益。

植物保护

不同植食性昆虫危害棉花后棉株5种防御基因表达变化

李静, 张帅, 崔金杰

中国农业科学. 2011, 44(21):  4377-4384.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.006

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【目的】了解棉花体内5种防御蛋白基因在棉花防御植食性害虫中的作用。【方法】使用定量PCR分别测定棉铃虫、斜纹夜蛾、甜菜夜蛾危害和机械损伤0（未处理的对照）、6、12、24、48、60 h后，多酚氧化酶（PPO）、叶绿体铜/锌超氧化物歧化酶、ATP合酶β亚基、捕光蛋白复合物Ⅱ、热激蛋白（Hsp70）等5种棉花防御蛋白基因表达量的变化。【结果】在4种危害处理试验中，多酚氧化酶、热激蛋白和叶绿体铜/锌超氧化物歧化酶对昆虫的取食危害应答较强，捕光蛋白复合物Ⅱ对机械损伤的应答较强，ATP合酶β亚基对昆虫的取食危害和机械损伤应答都较强。PPO对棉铃虫危害应答较快，对甜菜夜蛾危害的应答反应较为迟钝，对斜纹夜蛾的危害没有特异的应答。经过上述4种处理，棉花体内Hsp70表达量都有明显的反应，对棉铃虫和甜菜夜蛾危害反应上调较大。ATP合酶β亚基在受到对机械损伤和斜纹夜蛾危害后表达量下调，而在受到棉铃虫和甜菜夜蛾危害后表达量上调。捕光蛋白复合物Ⅱ在受到对机械损伤、甜菜夜蛾和斜纹夜蛾危害后表达量下调，而在受到棉铃虫危害后表达量上调。叶绿体铜/锌超氧化物歧化酶在受到对机械损伤和斜纹夜蛾危害后表达量下调，而在受到棉铃虫和甜菜夜蛾危害后表达量上调，该基因对斜纹夜蛾危害的应答较强，对甜菜夜蛾危害特异性应答较弱。【结论】棉花对于不同昆虫的危害所产生的应答响应不同，具有一定的专一性。

北京地区不同桃蚜种群的抗药性研究

宫亚军, 王泽华, 石宝才, 康总江, 朱亮, 郭晓军, 刘建华, 魏书军

中国农业科学. 2011, 44(21):  4385-4394.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.007

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【目的】明确北京地区蔬菜主要害虫桃蚜的抗药性水平。【方法】采用室内生物测定方法检测北京地区6个田间种群和1个室内敏感种群对5种杀虫剂的敏感性，用双向等位特异PCR技术检测击倒抗性水平，并检测桃蚜体内2种抗性相关酶的活力。【结果】结果表明通州、顺义、大兴、海淀、延庆和门头沟6个田间种群和1个敏感种群桃蚜均对高效氯氰菊酯产生了高水平抗性，除延庆和门头沟外，抗性纯合子比例均在90%以上。门头沟、通州和延庆种群的桃蚜对毒死蜱和吡虫啉抗性倍数分别在2.05—4.24和32.03—41.27倍之间。除大兴种群对阿维菌素和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（抗性倍数分别为3.45和2.82），海淀种群对阿维菌素的敏感性有所降低外（抗性倍数为2.66），其它种群桃蚜对这2种药剂仍处于较敏感状态（抗性倍数在0.19—1.44）。羧酸酯酶活力与桃蚜对毒死蜱和吡虫啉的抗性倍数间存在明显的正相关性，乙酰胆碱酯酶活力与此2种杀虫剂的抗性倍数成负相关性。【结论】北京地区不同种群的桃蚜几乎对5种常用药剂均产生了不同程度的抗性。防治中应当停止使用高效氯氰菊酯，避免使用毒死蜱，部分地区可以交替使用阿维菌素、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和吡虫啉。

土壤肥料·节水灌溉·农业生态环境

渭北旱塬不同施肥与覆盖栽培对冬小麦产量形成及土壤水分利用的影响

薛澄, 王朝辉, 李富翠, 赵护兵, 周玲, 李小涵

中国农业科学. 2011, 44(21):  4395-4405.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.008

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【目的】研究不同施肥和覆盖栽培模式对渭北旱塬旱地冬小麦产量和水分利用的影响。【方法】通过田间试验，研究测土推荐施氮、顶凌追肥、垄覆沟播、秸秆还田覆盖等措施对冬小麦产量、生物量、收获指数、水分利用效率及土壤水分周年变化的影响。【结果】旱地早春追肥使冬小麦增产6%—14%，水分利用效率提高7%—10%，达到12.2—13.6 kg•hm-2•mm-1；“减氮+垄覆沟播”增产达15%—41%，水分利用率提高10%—30%，达到12.2—16.5 kg•hm-2•mm-1。主要原因是，通过测土优化氮肥用量，采用基肥﹕追肥（3﹕1）方式，并与起垄覆膜栽培措施相结合可促进冬小麦利用深层土壤水分，提高冬小麦抽穗开花期植株含水量和成熟期的生物量及收获指数；虽然生育期耗水增加，但水分利用效率也提高。而单纯减少氮肥用量，不利于水分利用效率的提高；夏季垄上覆膜沟内覆盖作物秸秆可提高休闲效率，利于土壤水分恢复，实现土壤水分周年平衡和旱地小麦可持续增产。【结论】优化施氮结合垄覆沟播是黄土高原渭北旱地小麦增产增效的栽培模式。

移栽和直播油菜的氮肥施用效果及适宜施氮量

王寅, 鲁剑巍, 李小坤, 李继福, 刘朋朋, 徐维明, 杨运清

中国农业科学. 2011, 44(21):  4406-4414.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.009

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【目的】研究氮肥施用对移栽油菜和直播油菜生长发育状况和籽粒产量的影响，探寻直播油菜的氮素营养特点，比较和明确两种种植方式下油菜氮肥施用效果和适宜施氮量的差异，为油菜科学施肥提供依据。【方法】2009—2010年度在湖北省沙洋县布置移栽油菜和直播油菜氮肥用量田间试验，开展田间调查和产量分析，根据肥效模型确定适宜施氮量。【结果】由于种植方式的不同，移栽油菜和直播油菜生育期内植株形态和生长发育特点存在较大差异。移栽油菜单株优势明显，植株各方面发育均好于直播油菜，而直播油菜具有群体优势，籽粒产量水平与移栽油菜接近。施氮有效促进移栽油菜和直播油菜的生长发育，显著提高油菜籽粒产量。同时，两种种植方式下油菜氮肥施用效果存在差异，移栽油菜各项生长发育指标及产量形成受氮素影响更为明显。直播油菜拥有庞大的根群结构，吸收土壤氮素的能力强，对外源氮肥需求量少于移栽油菜。本试验条件下，移栽油菜和直播油菜的适宜施氮量分别为228.4 kg•hm-2和130.3 kg•hm-2。【结论】移栽油菜和直播油菜的植株形态、生长发育及施氮效果存在明显差异，产量水平相近的情况下直播油菜氮肥适宜用量明显低于移栽种植。因此直播油菜的经济效益较高，具有较好的发展前景。

园艺

苹果基因组SSR位点分析与应用

关玲, 章镇, 王新卫, 薛华柏, 刘艳红, 王三红, 乔玉山

中国农业科学. 2011, 44(21):  4415-4428.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.010

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【目的】通过对‘金冠’苹果基因组SSR位点的统计分析，为蔷薇科果树应用SSR分子标记进行高通量的遗传分析提供理论与实践基础。【方法】运用NCBI数据库中‘金冠’苹果基因组数据，分析其SSR位点分布情况，并根据SSR位点的搜索结果，设计68对引物（每条染色体设计4对），利用苹果品种对所设计引物进行应用性验证并利用梨杂交群体进行通用性检测。【结果】苹果基因组中SSR序列主要是完全重复型，17条染色体共存在163 426个SSR位点，平均每隔3.22 kb存在1个。单核苷酸至三核苷酸重复基序在染色体水平上分布较均匀，而四核苷酸至六核苷酸重复基序的分布差异较大。单核苷酸与二核苷酸重复基序所占比例最大，两者占基因组内SSR位点总数的91.67%，单核苷酸重复基序主要以A/T重复为主，二核苷酸的重复基序主要以AT/TA重复为主。在苹果品种中验证所设计的68对引物，有62对可以扩增出预期目的片段，37对存在扩增多态性。在梨杂交群体上应用所设计的68对引物，有40对具扩增目的片段，其中16对具扩增多态性。【结论】苹果基因组内SSR分布呈现一定的规律性，初步验证SSR位点在亲缘关系较近的物种间高度保守并可以通用，基于基因组数据发掘SSR位点用于后续的相关遗传研究具有可行性。

赞皇大枣枣疯病植原体分子分类

杨海旭, 王洋, 赵彦檩, 赵锦, 刘孟军

中国农业科学. 2011, 44(21):  4429-4437.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.011

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【目的】枣疯病是一种重要的植原体病害，本试验旨在明确惟一已知的天然三倍体品种--赞皇大枣枣疯病植原体的分类地位，为赞皇大枣枣疯病植原体分类研究提供参考。【方法】利用植原体16S rDNA通用引物对赞皇大枣枣疯病病株的DNA进行PCR扩增和克隆测序，通过BLAST比对进行序列分析，利用临位相连法构建16S rDNA系统演化树，并应用DNAstar软件进行虚拟RFLP分析。【结果】获得的赞皇大枣枣疯病植原体16S rDNA序列长度为1 850 bp（GenBank登录号GU184180），包括1 529 bp的16S rDNA基因全序列、264 bp的邻近间隔区序列及57 bp的23S rDNA部分基因序列。同源分析表明，赞皇大枣枣疯病病原16S rDNA序列与其它植原体的相似性在87%—98%，其中与榆树黄化 Elm yellows（EY）(GenBank登录号l33763)最高相似性为98%；与大多数二倍体枣品种的植原体序列相似率达99%以上；其虚拟RFLP图谱与4个16SrⅤ亚组的代表序列图谱差异显著,赞皇大枣枣疯病植原体延伸因子tuf基因的序列(GenBank登录号JN001985) 比对结果表明，与其它亚组序列同源性为52.3%—76.7%。【结论】三倍体赞皇大枣枣疯病病原属于榆树黄化组(16Sr V)，并与其中的B亚组亲缘关系最近；与二倍体品种的病原分类地位一致，说明枣疯病植原体在系统进化上比较保守。

基于AHP的中国传统盆栽菊花产业化品种筛选

张亚琼, 张伟, 戴思兰, 季玉山, 何晶

中国农业科学. 2011, 44(21):  4438-4446.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.012

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【目的】建立中国传统菊花品种综合评价体系，为筛选和利用适宜产业化生产的品种提供依据。【方法】通过田间盆栽试验对32个大花型秋菊品种的19个观赏性和适应性指标进行观测统计，应用层次分析法，从观赏性状、抗逆性、栽培流程3个方面出发，构建传统菊花品种综合评价体系。【结果】确定了19个评价因子的权重值，其中花色、苗期生长势、株高、脚芽萌发力、自然花期时间、苗期抗旱性的权重分别为0.1469、0.1206、0.0959、0.0815、0.0815、0.0679，所占比重较大；依据品种综合评价得分，将试验品种划分为优良品种、较优种、较差种、差种4个等级，其中优良品种整体性状符合选择目标，可直接进行产业化生产。【结论】筛选出7个既有中国传统特色，又适于规模化生产的盆栽菊花品种，为进一步开发中国传统菊花品种提供了一种有效方法。

贮藏·保鲜·加工

Bacillus subtilis fmbj与2-脱氧葡萄糖协同作用Rhizopus stolonifer的生物防治效果

周小虹, 陆兆新, 吕凤霞, 别小妹

中国农业科学. 2011, 44(21):  4447-4453.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.013

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【目的】通过添加佐剂2-脱氧葡萄糖（2-DOG）的方法提高拮抗细菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis fmbj)菌株的生防效果。【方法】分别在PDA平板和水蜜桃上测定2-DOG对拮抗菌B.subtilis fmbj和病原菌桃软腐病菌葡枝根霉(Rhizopus stolonifer)生长的影响及B.subtilis fmbj与不同浓度2-DOG协同作用对R.stolonifer的防治效果。【结果】平板试验表明，2-DOG浓度仅为0.3 mg•mL-1时,可完全抑制R.stolonifer的生长；而2-DOG高达20 mg•mL-1，B.subtilis fmbj依然存活,表现出对2-DOG有较高的耐受性。桃上接种试验发现，单独使用浓度为3.9×108 CFU/mL B.subtilis fmbj时，桃果实发病率为30%；4 mg•mL-1 2-DOG单独使用时桃果实发病率为35%；而当4 mg•mL-1 2-DOG和3.9×107 CFU/mL B.subtilis fmbj配合使用时,可完全抑制果实的腐败。【结论】拮抗菌B.subtilis fmbj和2-DOG协同作用比单独使用对桃果实软腐病的防治效果明显，该研究结果为桃果实采后病害控制和保藏提供了有效的方法与途径。

辐照对黄原胶分子量、结构及流变性能的影响

李彦杰, 哈益明, 王锋, 李咏富

中国农业科学. 2011, 44(21):  4454-4463.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.014

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【目的】探讨辐照剂量对黄原胶分子量、分子量分布、结构、流变性能的影响，为辐照技术在黄原胶及其它多糖分子修饰上的应用提供理论依据。【方法】以60Co-γ射线对固态黄原胶进行不同剂量 (0—400 kGy) 的辐照，采用凝胶渗透色谱（GPC）、X-射线衍射(XRD)、红外扫描(FTIR)、紫外-可见光扫描(UV-vis)以及流变仪等对样品的分子量、分子量分布、结构以及流变性能进行表征和测定。【结果】低于10 kGy剂量的辐照使黄原胶分子量增大，分子量分布变窄；辐照剂量高于10 kGy后，分子量随剂量增大而降低，而分子量分布先变宽，在50 kGy时达到最大后，又趋于变窄。X-射线衍射、红外及紫外分析表明，辐照造成黄原胶分子上的部分糖苷键发生断裂，引起结晶度的变化，并在链端产生少量羰基，但其基本化学结构和晶体结构保持稳定。辐照处理后，黄原胶溶液的表观黏度与剪切速率、剪切时间和温度之间的关系均发生了显著变化。【结论】γ射线可同时作用于黄原胶的结晶区和无定形区，引发聚合和降解两种辐照效应，并对其分子量、分子量分布造成显著影响，进而使其流变性能发生改变。

畜牧·资源昆虫

早期断奶羔羊代乳粉饲喂水平对营养物质消化代谢及血清生化指标的影响

岳喜新, 刁其玉, 马春晖, 邓凯东, 屠焰, 姜成钢, 杜红芳

中国农业科学. 2011, 44(21):  4464-4473.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.015

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【目的】研究代乳粉饲喂水平对早期断奶羔羊生长发育、营养物质消化代谢及血清生化指标的影响。【方法】27只新生陶赛特（♂）×小尾寒羊（♀）杂交F1代羔羊随机分为低（L）、中（M）、高（H）3个饲喂水平组，分别按体重的1.0%、1.5%和2.0%饲喂代乳粉。羔羊于50—60、80—90日龄期间分别进行一期消化代谢试验，并在50、90日龄采集血液样品，分析血清生化指标。【结果】羔羊的体重（BW）和体尺（BL）随代乳粉饲喂水平的升高而增加，低、中、高3个处理组间的BW和BL差异显著（P＜0.05）。干物质（DM）、有机物（OM）、总能（GE）、氮（N）、粗脂肪（EE）、Ca、P消化率随饲喂水平的升高而升高，低饲喂水平组DM、GE、N、EE、Ca、P的消化率显著低于高饲喂水平组（P＜0.05），但在85—90日龄时，高饲喂水平组的N沉积率最低，仅为70.9%，显著低于低饲喂水平组的78.7%（P＜0.05）。50日龄时，各处理间的总蛋白（TP）、尿素氮（BUN）、血糖（GLU）、胆固醇CHOL、甘油三酯（TG）差异不显著（P＞0.05），但低、中饲喂水平组碱性磷酸酶（ALP）活性显著低于高饲喂水平组（P＜0.05）。90日龄时，高饲喂水平组CHOL显著高于低饲喂水平组（P＜0.05）。【结论】适宜代乳粉饲喂水平可显著提高羔羊生长性能及其对营养物质的消化率，改善饲料转化率（FCR）。20—50、50—70和70—90日龄羔羊的代乳粉饲喂水平分别按体重2.0%、1.5%和1.0%为宜。

温氏土鸡和白洛克鸡胚小肠EAATs mRNA表达差异及发育性变化

黎相广, 严会超, 曾佩玲, 张德祥, 王修启

中国农业科学. 2011, 44(21):  4474-4480.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.016

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【目的】研究温氏土鸡（WYFC）和隐性白洛克（WRRC）鸡胚小肠酸性氨基酸转运载体EAAT2（SLC1A2）和EAAT3（SLC1A1）mRNA的表达差异和发育性变化。【方法】选取蛋重相近的两品种纯系种蛋各96枚，每个品种随机分为6组，每组16枚，在相同的条件下进行孵化。分别就每个品种在9（E9）、12（E12）、14（E14）、17（E17）和19胚龄（E19）及出壳当天（DOH）选取16枚鸡胚，称重后采集小肠样品，采用real-time RT-PCR方法检测小肠EAATs mRNA的相对表达丰度。【结果】（1）9、12、14、17和19胚龄隐性白洛克胚蛋重量及出壳当天雏鸡体重极显著高于温氏土鸡（P＜0.01）；（2）从发育性变化来看，EAAT2 mRNA在两个品种表达基本一致，即E9—14表达量下调，E17有所上调，随后下调，E12、E17、E19和DOH两品种差异极显著（P＜0.01），E14差异显著（P＜0.05）；EAAT3 mRNA在两个品种都表现为随胚龄增加而表达上调，E19两品种差异极显著（P＜0.01），E12差异显著（P＜0.05）；（3）EAAT2和EAAT3 mRNA表达丰度，温氏土鸡鸡胚小肠高于隐性白洛克，不同发育阶段对其都有影响，均存在“品种×胚龄”的互作效应。【结论】EAATs mRNA表达丰度在品种和胚龄间存在差异，不同基因表达的发育模式亦不相同。

阴外动脉灌注氨基酸对奶山羊乳腺摄取乳成分前体物的影响

王强, 敖长金, 嘎尔迪, 卢德勋, 高民, 段斌, 冯子琪

中国农业科学. 2011, 44(21):  4481-4487.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.017

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【目的】研究阴外动脉灌注不同平衡模式的氨基酸对奶山羊乳腺摄取乳成分前体物（milk components precursors，MCP）的影响规律。【方法】选用2—3周岁，体重、产奶量相近、安装有阴外动脉和腹部皮下静脉血插管的关中奶山羊3只，由阴外动脉灌注不同平衡模式的氨基酸，在灌注前后分别采集动静脉血浆，测定乳蛋白前体物（milk protein precursors，MPP）、乳脂前体物（milk fat precursors，MFP）和乳糖前体物（milk lactose precursors，MLP）的含量和乳腺对其的摄取。【结果】阴外动脉灌注不同平衡模式混合氨基酸改变了乳腺对MPP、MFP的摄取（P＜0.05），乳腺对MLP的摄取理想模式组和平衡模式组均高于不灌注组，但理想模式组与不灌注组差异不显著（P＞0.05），平衡模式组与不灌注组差异显著（P＜0.05）；不同氨基酸模式灌注组产奶量和乳成分明显高于对照组（P＜0.05）。【结论】阴外动脉中氨基酸的平衡改变了乳腺对乳成分前体物的摄取，有利于乳的合成。本试验条件下，阴外动脉中必需氨基酸达到理想平衡（AABI=0.972）时乳腺对MCP的摄取效果最佳。

piggyBac转座子介导的转基因家蚕丝腺生物反应器研究进展

钟伯雄, 危浩, 庄兰芳

中国农业科学. 2011, 44(21):  4488-4498.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.018

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综述了基于piggyBac转座子的转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白的3个关键环节：（1）外源目的基因高效插入家蚕基因组；（2）转基因家蚕的高效、快捷的检测；（3）具有生物活性的外源目的蛋白的高效表达和纯化。同时介绍了有关转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白的研究进展，为更好地利用转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白提供了参考。

兽医

建立环介导间接PCR同时检测3种主要猪源性病毒

郑鸣, 边传周, 王老七

中国农业科学. 2011, 44(21):  4499-4507.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.019

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【目的】建立同时检测猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的环介导间接PCR方法，实现3种病毒快速检测。【方法】根据GenBank数据库中猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的核苷酸序列设计3对特异性探针，利用PCR技术分别标记于大豆Lectin基因片段的两端形成3种不同的报告基因，此标记的报告基因与3种待测靶标基因经杂交、缺口补平、环化后，采用1对引物反向PCR扩增报告基因，建立了PCV2、CSFV和PRRSV的环介导间接PCR检测方法，扩增片段大小分别为564 bp、434 bp和338 bp，该方法即可用于单病毒检测又可用于多病毒检测。【结果】灵敏度和特异性试验结果表明，无论是单病毒检测还是多病毒检测，该法都具有高度特异性，与其它病原检测无明显交叉反应；对PCV2、CSFV和PRRSV 3种病毒同时检测的底限分别为0.8、25和6.2 pg•μL-1，和单个病毒的检测灵敏度相同。利用环介导间接PCR和常规PCR对20份临床样本进行比较检测，结果表明，无论单病毒检测还是多病毒检测,其结果均与常规PCR检测结果完全一致。【结论】环介导间接PCR检测技术可用于PCV2、CSFV和PRRSV 3种病毒的同时检测，是一种简便快速、灵敏、特异的病原学诊断工具。

应用重组MSG1蛋白检测猪附红细胞体抗体的ELISA检测方法的建立

刘永夏, 刘建柱, 成子强, 周栋, 王振勇, 刘海涛, 王林, 柴同杰

中国农业科学. 2011, 44(21):  4508-4515.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.020

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【目的】针对猪附红细胞体g1基因编码的MSG1表面粘附蛋白（rMSG1）和以此蛋白制备的多克隆抗体，建立相应的ELISA方法进行猪附红细胞体的临床检测，并进行效果评估，以获得一种猪附红细胞体感染的有效检测手段。【方法】将MSG1-pET28c_E.coli BL21菌株，在适宜的条件进行诱导表达，经菌体破碎、层析等步骤获取纯化的目的蛋白。以纯化的rMSG1制备免疫原接种小鼠，获取符合要求的多克隆抗体。以rMSG1和多克隆抗体建立ELISA检测方法，分析其敏感性、特异性、符合性和重复性。【结果】接种后获得了符合效价的抗血清；基于rMSG1的间接ELISA方法临床检测猪附红细胞体感染率为46.25%，其中阳性样本对已知小鼠抗血清有明显的阻断作用，并且与其它一些抗原无交叉反应；此ELISA方法的特异性和敏感性分别可达到97.06%和95.92%，较间接血凝试验(IHA)有更高的检出率。【结论】结果显示MSG1具有良好的抗原性，建立的ELISA方法具有较高的敏感性、特异性、符合性和可重复性，在临床检测中可以取得理想的效果。

仔猪小肠黏膜上皮细胞体外分离培养及鉴定

周传丽, 刘铮铸, 俞英, 张勤

中国农业科学. 2011, 44(21):  4516-4524.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.021

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【目的】阐明产肠毒素大肠杆菌F18（ETEC F18）引发仔猪腹泻的机理，针对其候选基因FUT1 的CDS区第307位点处的突变（G→A），建立3个仔猪小肠黏膜上皮细胞系（GG、GA和AA）。【方法】首先以胎鼠和仔猪为试验材料，确定小肠上皮细胞的最佳分离方法。采用XI型胶原酶和I型中性蛋白酶的联酶混合液，将胎鼠小肠组织机械剪碎后用联酶进行消化和直接将联酶灌注到仔猪小肠腔内消化的两种方法进行比较。针对仔猪小肠黏膜上皮细胞体外培养过程中成纤维细胞污染难以消除的问题，本研究采用局部画圈法逐步去除成纤维细胞。最后，用电镜和CK18免疫荧光染色对纯化后的原代仔猪小肠黏膜上皮细胞进行鉴定。【结果】两种小肠上皮细胞分离效率对比表明，后一种消化方式更为有效。进而取出生12 h内未吃初乳的大白仔猪，剖腹剪取其小肠段，使用联酶混合液灌注消化分离得到形态完整、容易贴壁生长的小肠绒毛细胞团。电镜和CK18免疫荧光染色结果均显示，小肠黏膜上皮细胞纯度达90%以上。经纯化处理，最后获得了FUT1基因型为GG和GA的两种小肠黏膜上皮细胞。仔猪原代小肠黏膜上皮细胞培养周期显示，7代前细胞生长状况良好，形态为典型的上皮细胞样，单层细胞呈铺路石排列，培养至第9代，细胞出现生长停滞、胞体空泡化等现象。【结论】最终获得了FUT1基因型为GG和GA的仔猪原代小肠黏膜上皮细胞。建立了仔猪小肠黏膜上皮细胞分离及培养方法，为后续的细胞建系工作奠定了良好的基础。

农业信息技术

近20年关中地区土地利用/覆盖变化动态与格局

郝慧梅, 郝永利, 任志远

中国农业科学. 2011, 44(21):  4525-4536.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.022

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【目的】掌握区域土地利用变化的实际状况，提高土地资源科学管理、高效持续利用能力。【方法】基于RS和GIS技术，采用空间转移矩阵、修正动态度及开发程度等模型分析关中地区1990—2007年土地利用变化动态。【结果】区域土地利用变化显著而复杂，耕、林、草之间的双向流转空间上并存，1990—2000年相对剧烈，2000—2007年较为有序稳定，整体向着改善生态的方向发展；17年建设占用耕地共18.33万hm2且以水浇地为主，空间上主要发生在关中盆地区、时间上主要在后一阶段。修正的单一和区域综合土地利用动态度可定量表达不同时间段土地利用变化差异、对比区域间土地利用类型变更速度差异；后者结合变化幅度还指示区域土地利用行为的有序程度。【结论】土地利用政策和经济利益是驱动区域土地资源的开发利用方式不断变化的动力。加强关中盆地区的耕地保护，稳定和推进渭北高原和秦岭-关山区的生态恢复和建设成果，是未来关中地区土地利用管理中的重要环节。

研究简报

不同类型甘薯品种块根淀粉粒粒度的分布特征

史春余, 姚海兰, 张立明, 柳洪鹃, 张超, 刘桂玲

中国农业科学. 2011, 44(21):  4537-4543.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.023

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【目的】阐明不同类型甘薯块根淀粉粒粒度的分布特征及其与淀粉品质的关系。【方法】选用6个淀粉型品种、5个食用型品种和1个兼用型品种，研究块根中淀粉粒的体积和数目分布、淀粉粒体积和数目分布与淀粉及其组分含量的相关性。【结果】甘薯块根含有小（粒径＜3.36 µm）、中（粒径3.36—19.76 µm）和大（粒径＞19.76 µm）3种类型淀粉粒，其粒径范围为0.39—55.14 µm。淀粉粒体积和数目都表现为双峰分布，低谷粒径均为3.36 µm；其中，粒径＜3.36 µm的淀粉粒体积占总体积的9.8%—18.5%，而粒径＜3.36 µm的淀粉粒数目占总数目的97.7%—99.1%。与淀粉型品种相比，食用型品种粒径＜3.36 µm的淀粉粒所占体积百分比和粒径＜1.00 µm的淀粉粒所占数目百分比较高。块根总淀粉、直链淀粉和支链淀粉含量与小型和中型淀粉粒的体积百分比呈显著负相关，与大型淀粉粒的体积百分比呈显著正相关；支/直链淀粉比率与小型和中型淀粉粒的体积百分比呈显著正相关，与大型淀粉粒的体积百分比呈显著负相关。【结论】食用型甘薯块根中小型淀粉粒所占比例较高，而淀粉型甘薯块根中大型淀粉粒所占比例较高。

粉垄栽培甘蔗试验增产效果

韦本辉, 甘秀芹, 申章佑, 宁秀呈, 陆柳英, 韦广泼, 李艳英, 胡泊, 刘斌, 吴延勇

中国农业科学. 2011, 44(21):  4544-4550.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.21.024

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【目的】评价粉垄栽培技术相比于传统栽培方法种植甘蔗的优势所在。【方法】选用新台糖22号和柳城03-1137两个品种，在不同地区进行粉垄栽培和传统栽培比较试验，在甘蔗工艺成熟期进行根系、绿叶、蔗茎性状、产量、品质及冬笋芽数等调查测定。【结果】粉垄栽培与传统栽培相比，根系鲜重增加了115.05%—146.48%；完全展开绿叶数（功能叶片）增加14.65%—19.35%；蔗茎产量增加21.91%—27.35%；甘蔗蔗糖含量、蔗汁蔗糖含量分别增加3.81%—5.17%、3.63%—5.75%，蔗汁还原糖分降低5.50%—9.76%；宿根冬笋芽数增加47.64%—197.70%。【结论】粉垄栽培的甘蔗，根系特别发达，功能叶片数增加，产量提高，品质改善，冬笋芽数增加。粉垄栽培方法是一项较好的栽培新方法。